【摘 要】
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该论文建立了紫菜总DNA提取、纯化,质粒状DNA提取、富集纯化及分子分类的一系列新方法.用海螺酶处理紫菜叶状体制备的细胞作材料,用SDS-蛋白酶K作裂解液,裂解物无粘性,可很容
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该论文建立了紫菜总DNA提取、纯化,质粒状DNA提取、富集纯化及分子分类的一系列新方法.用海螺酶处理紫菜叶状体制备的细胞作材料,用SDS-蛋白酶K作裂解液,裂解物无粘性,可很容易地提取到总核酸与总DNA,且提取物中多糖污染很少.此提取法被称之为细胞法.试验建立了纯化DNA粗提物的三种方法:琼脂糖包埋-小室电洗脱法,玻璃粉浆(glassmilk)法及Wizard DNA Clean-up柱层析法.在条斑紫菜与坛紫菜总DNA酶切图谱上有明显的DNA带型,且HaeⅢ酶切带型比EcoRI、PstI的酶切带型清晰.在EcoRI、PstI及HaeⅢ三种酶切图谱上,两种紫菜的DNA带型明显不同,且很容易发现条斑紫菜或坛紫菜特有的条带,总DNA带型具有种的特异性.这是分子分类的一种新方法,称之为总DNA直观RFLP分析法.在条斑紫菜与坛紫菜总DNA中直接发现质粒状DNA为紫菜质粒状DNA的研究提供了非常简便的分离方法.此种发现、提取紫菜质粒状DNA的方法被称之为异硫氰酸胍法.试验还建立了同地对质粒状DNA进行纯化与富集的方法.
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