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目的：体外使用CD73(5’-核酸酶)特异性抑制剂APCP(5’-α,β-亚甲基-二磷酸腺苷)阻断细胞腺苷酸代谢,探讨其对人胃腺癌细胞HGC-27和人正常胃粘膜细胞GES-1生长及淋巴管生成因子VEGF-C、VEGF-D表达的影响及其机制。为人胃腺癌组织淋巴管生成及淋巴道转移的研究及治疗提供依据。
方法：体外培养HGC-27及GES-1细胞达指数生长,两种细胞分别设正常组(无药物干预组)和APCP不同浓度干预组,倒置显微镜镜下观察各组细胞生长状态,MTT法检测各组细胞活性,免疫组化法观测各组细胞淋巴管生成因子VEGF-C、VEGF-D的表达及其积分光密度。各组数据均用SPSS 10.0统计软件处理,计量资料用平均值±标准差(-X±S)表示,组间比较用SNK-q检验,两两比较。
结果:APCP各干预组的人胃腺癌细胞HGC-27,同无药物干预组细胞相比,随APCP浓度增加,细胞生长表现缓慢,细胞胞浆皱缩,细胞界线模糊,各干预组细胞数量减少,淋巴管生成因子VEGF-C、VEGF-D的表达减少(OD无药物组=2.09±0.18,OD10μuml/l组=1.79±0.14,OD50μmol/l组=1.75±0.15,OD100μmaol/l m=1.63±0.17,VEGF-C(IOD)无药组=10122.94±520.37,VEGF-C(IOD)10μmol/l组=6864.27±1088.93,VEGF-C(IOD)50μmoL/组=4773.15±791.20,VEGF-C(IOD)100μmol/l组=3472.22±529.32,VEGF-D(IOD)无药物组=3088.93±676.81,VEGF-D(IOD)10μmol/l组=2520.36±497.01,VEGF-D(IOD)50μmol/组=1491.20±471.56,VEGF-D(IOD)100μmol/l组=532.36±169.92)；APCP各干预组的人正常胃粘膜细胞GES-1,同无药物干预组相比,细胞生长表现缓慢,细胞胞浆皱缩,细胞界线模糊,各干预组细胞数量减少,细胞淋巴管生成因子VEGF-C、VEGF-D的表达减少(OD无药物组=2.16±0.19,OD 10μmol/l组=1.71±0.17,OD 50μmol/l组=1.95±0.15,OD 10μmol/l组=1.47±0.14,VEGF-C(IOD)无药物组=8642.76±607.59,VEGF-C(IOD)10μmol/l组=3514.36±935.68,VEGF-C(IOD)50μmol/l组=4703.25±519.30,VEGF-C(IOD)100μmol/l组=2372.18±489.37,VEGF-D(IOD)无药物组=3829.66±227.26,VEGF-D(IOD)10μmol/l组=1328.36±197.01,VEGF-D(IOD)50μmol/l组=2411.36±171.32,VEGF-D(IOD)100μmol/l=535.67±159.62),但在GES-1细胞中,50μmol/lAPCP细胞组同10μmol/lAPCP细胞组和100μmol/lAPCP细胞组相比较,细胞生长表现加快,细胞胞浆延展,细胞数量增加,淋巴管生成因子VEGF-C、VEGF-D的表达增加。
结论:CD73特异性抑制剂APCP可影响人胃腺癌细胞HGC-27及正常胃粘膜细胞GES-1的生长,减少细胞数量,降低细胞淋巴管生长因子VEGF-C、VEGF-D的表达；不同浓度APCP对正常胃粘膜细胞GES-1的作用效果有所不同,推测其对正常胃粘膜细胞CD73功能影响的模式不尽相同,导致CD73发挥作用方式不同；APCP影响人胃腺癌细胞的机制可能与癌细胞的生物学特性有关。