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随着保护地高附加值经济作物的连年栽培,土传病害问题愈发突出,熏蒸剂也因此得以更广泛的应用。但鉴于熏蒸剂的广谱性,在杀死有害生物的同时,不可避免地对非靶标生物产生一定的影响。为明确熏蒸剂对土壤微生物群落结构的影响,本研究选取二甲基二硫(DMDS)与氯化苦1:1混用,采取传统平板法、BIOLOG方法和分子生物学的方法对土壤微生物群落进行了研究,初步明确了两种药剂混用对土壤微生物多样性的影响。DMDS与氯化苦1:1混用熏蒸处理后,当浓度达到68.34 mg·kg-1时即可达到很好的防治土传病原镰孢菌属和疫霉属的效果,而且持续112 d后,仍能达到很高的防治效果。浓度为683.36 mg·kg-1时,防效可以达到95%以上,但恢复培养28 d后出现了菌落数显著增加的现象,可能是由于高浓度处理导致了对土壤中微生物群落结构的破坏,致使微生物群落结构单一,优势菌显著增加。所以,DMDS与氯化苦1:1混用熏蒸处理防治土传病原真菌,在保证其防效的同时,应合理设置施用浓度。采用传统的平板培养法对DMDS与氯化苦1:1混用熏蒸处理后的土壤进行研究发现,浓度为68.34 mg·kg-1处理对土壤中细菌、真菌和放线菌即表现出明显的抑制作用,细菌群落在恢复培养3 d后恢复,而真菌和放线菌群落在恢复培养28 d后恢复。浓度为683.36 mg·kg-1处理时,土壤中细菌和放线菌群落在培养49 d时出现显著增加现象;真菌群落在培养28 d时显著增加,且增幅最大。所以,DMDS与氯化苦1:1混用熏蒸处理,浓度过高时对土壤中的真菌群落的影响最大。BIOLOG ECO微平板研究发现,当浓度达到68.34 mg·kg-1时,会抑制土壤微生物的生长,微生物的多样性也会受到不同程度的破坏。McIntosh指数显著低于对照,而Shannon指数、Simpson指数与对照无显著差异。浓度为683.36 mg·kg-1处理在恢复培养49 d时,AWCD值显著增长,与对照无显著性差异。McIntosh指数在恢复培养112 d时各处理与对照无显著性差异,表明此时微生物的对碳源的利用种类已无显著性差异。氯化苦与DMDS混用熏蒸,会降低微生物对碳源的利用,抑制微生物的生长,当浓度达到136.67 mg·kg-1后才会显著改变微生物对碳源的利用方式。经过一定时间的恢复培养后,这种影响会逐渐减弱,趋近于对照组的土壤微生物水平。采用PCR-DGGE技术手段对熏蒸处理后恢复培养0 d,49 d和112 d的土壤进行细菌群落的功能多样性分析。研究结果表明,DMDS与氯化苦1:1熏蒸处理,浓度到达68.34 mg·kg-1以上时的,会对土壤微生物的细菌群落结构产生一定的抑制作用。在恢复培养49 d后,这种影响逐渐减弱,直至恢复培养112 d,逐渐恢复至对照无显著性差异。土壤细菌群落的均匀度在整个熏蒸后恢复阶段无明显变化。