论文部分内容阅读
第一部分老年APP/PS1模型小鼠大脑海马齿状回内有髓神经纤维和少突胶质细胞改变的体视学研究 目的：运用现代体视学方法定量研究16月龄雄性APP/PS1双转基因 AD模型小鼠海马齿状回有髓神经纤维和少突胶质细胞的改变，以期深入了解阿尔兹海默病海马齿状回(DG)的形态学改变。 方法：随机选用16月龄雄性野生型小鼠和16月龄雄性APP/PS1双转基因AD模型小鼠各7只。运用Morris水迷宫方法测试16月龄雄性野生型小鼠和16月龄雄性APP/PS1双转基因AD模型小鼠的空间学习记忆能力，然后麻醉处死，随机选择一侧大脑半球，按照体视学的抽样方法从每只小鼠海马 DG内抽取3-4个组织块送电镜，运用无偏体视学方法获得海马齿状回 DG总体积及其内有髓神经纤维参数：包括有髓神经纤维总长度、总体积、髓鞘平均厚度等。另一侧大脑半球用于制备50μm连续等距连续冰冻切片，等距随机抽样后进行少突胶质细胞CNPase特异性抗体免疫组化染色，运用无偏体视学方法计数海马齿状回内CNPase阳性细胞的数量。 结果：Morris水迷宫结果显示在前六天的隐蔽站台试验中模型组小鼠逃避潜伏期显著性长于野生型小鼠(分组效应: p=0.008， F=9.952；时间效应：p=0.023，F=3.082；时间分组交互作用：p=0.873， F=0.312)，在第七天的空间探索试验中模型小鼠穿台次数显著性少于野生型小鼠(p=0.011，t=-3.008)，原平台所在象限停留时间显著性短于野生型小鼠(p=0.002，t=-3.887)。虽然两组小鼠海马体积没有显著性差异，但是 DG区内有髓神经纤维的超微结构均存在退行性改变，体视学定量分析结果显示在0.5～1.1μm直径段模型组小鼠海马DG内有髓神经纤维长度较野生型组显著性降低(p=0.049， t=-2.192)。另外，两组小鼠大脑海马齿状回内CNPase阳性细胞数量无显著性差异(p=0.282，t=1.154)。 结论：16月龄时APP/PS1模型小鼠空间学习记忆能力显著性减退，我们推测海马 DG内0.5～1.1μm直径段有髓神经纤维显著性丢失可能是 APP/PS1模型小鼠空间学习记忆能力进行性减退的结构基础之一。 第二部分跑步锻炼对老年APP/PS1小鼠海马齿状回内有髓神经纤维和少突胶质细胞的作用 目的：研究跑步锻炼是否能够延缓老年APP/PS1双转基因AD模型小鼠学习记忆功能下降的进度。如果跑步锻炼对老年APP/PS1双转基因 AD模型小鼠的学习记忆功能障碍具有改善作用，那么是否可能通过影响海马齿状回及其内有髓神经纤维和少突胶质细胞来发挥作用。 方法：选用12月龄APP/PS1雄性双转基因小鼠14只，随机均分成模型对照组和跑步组，每组各7只。对跑步组小鼠进行跑步锻炼干预，速度10 m/min，每周干预5 d，休息2 d，为期4个月。跑步结束后，利用Morris水迷宫进行行为学测试，然后麻醉处死，随机选择一侧大脑半球，按照体视学的抽样方法从每只小鼠海马 DG内抽取3-4个组织块送电镜，运用无偏体视学方法获得海马齿状回 DG总体积及其内有髓神经纤维参数：包括有髓神经纤维总长度、总体积、外直径、内直径等。另一侧大脑半球用于制备50μm连续冰冻切片，等距随机抽样后进行少突胶质细胞CNPase特异性抗体免疫组化染色，运用无偏体视学方法计数海马齿状回内CNPase阳性细胞的数量。 结果：Morris水迷宫结果显示在前六天的隐蔽站台试验中两组小鼠逃避潜伏期无显著性差异(分组效应:p=0.200，F=1.837；时间效应：p=0.023，F=3.644；时间分组交互作用：p=0.282，F=1.326)，在第七天的空间探索试验中跑步组小鼠穿台次数与模型组小鼠相比无显著性差异(p=0.315，t=1.075)，原平台所在象限停留时间显著性长于模型组小鼠(p=0.015，t=2.823)。与模型组小鼠相比，跑步组小鼠虽然其海马总体积、DG总体积、有髓神经纤维总长度、总体积以及髓鞘平均厚度等均不具有显著性，但是 DG内有髓神经纤维在0.2～0.7μm直径段长度显著性大于模型组(p=0.023，t=2.598)。另外，与模型组小鼠相比，跑步组小鼠海马DG内CNPase阳性细胞数量无显著性改变(p=0.220，t=-1.331)。 结论：4个月跑步锻炼在一定程度上改善了16月龄雄性APP/PS1小鼠的空间记忆能力，且对其海马DG内0.2～0.7μm直径段有髓神经纤维具有一定保护作用。