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氮素是水体污染中的一类重要的污染物,对人体健康和环境有极大的危害,它主要以有机氮和无机氮两种形式存在。传统的生物脱氮是通过硝化和反硝化两个过程完成的,首先氨氮由自养的硝化细菌在好氧条件下转化为硝态氮,然后再通过异养的反硝化细菌在缺氧条件下将硝态氮还原为氮气,排出水体。因此,脱氮过程工艺环节较多,处理成本高,操作条件复杂等不足,极大地限制了生物脱氮技术的应用。好氧反硝化菌的发现,为生物脱氮提供了新的思路。本论文从土壤中筛选获得高效好氧反硝化有效微生物群,从而为生物脱氮技术提供较好菌源与技术。现将研究结果分述如下:
(1) 通过反硝化培养基定向筛选,从土壤中分离获得好氧反硝化有效微生物群,该有效微生物群反硝化速率为143.71 mg/L·d,并命名为OAI-EMF。研究表明OAI-EMF在以淀粉为有机碳源时,其反硝化速率达到了144 mg/L·d,Cu<2+>、Ni<2+>和Hg<2+>能抑制OAI-EMF反硝化作用,而Fe<3+>、Zn<2+>和Mn<2+>能激活OAI-EMF 反硝化作用。高浓度硝酸盐也能抑制 OAI-EMF 反硝化作用,而随着C/N 的增加OAI-EMF 反硝化速率和硝酸盐去除率都增加,在C/N 为25:1条件下,OAI-EMF 的硝酸盐去除率达到100%,反硝化速率为184 mg/L·d。
(2) 通过稀释涂布法从OAI-EMF中分离获得两株细菌,分别编号为NCDX-1和NCDX-2,根据菌株NCDX-1和菌株NCDX-2的生理生化实验,菌株NCDX-1 和菌株NCDX-2 分别符合动性球菌属 (Planococcus sp.) 和海球菌属 (Marinococcus sp.) 的特征,菌株NCDX-2 初步鉴定为白色海球菌(Marinococcus albus)。通过传统分离纯化技术及其反硝化作用分析,该有效微生物群由两种以上细菌组成。
(3) 选择聚乙烯醇作为 EMF 固定化载体,海藻酸钠为成型助剂,通过PVA-硼酸交联法制备了固定化EMF细胞。固定化EMF颗粒具有较好的脱氮生物活性、较好的机械稳定性和抗溶剂酸碱度,从而为固定化EMF在污水处理方面的应用提供了可能性。
(4)探讨了固定化 EMF脱氮最佳工艺,研究发现固定化 EMF 在 pH6.2~11.2,28℃~32℃,装料系数为20~40%左右的250mL三角瓶中,培养48h,固定化EM对硝酸盐的去除率最佳,达到了100%。与游离细胞比较,固定化EMF其对温度稳定性和对pH稳定性都有所提高,说明固定化EMF对外界不良环境的抗性增强了,能较好地适合工业化应用。