【摘 要】
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目的:器官保存液细菌污染在器官移植过程中十分普遍,其导致的患者器官移植术后感染致死率较高。为降低肾移植术后患者的感染率,开拓有效的预防手段,了解将头孢菌素预先加入到
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目的:器官保存液细菌污染在器官移植过程中十分普遍,其导致的患者器官移植术后感染致死率较高。为降低肾移植术后患者的感染率,开拓有效的预防手段,了解将头孢菌素预先加入到肾脏器官保存液的情况下,其抗菌活性的高低及对肾脏是否有损害作用,进行此实验。为临床有效的预防来源于器官保存液污染的肾移植术后感染提供理论基础。方法:配制对数生长期的细菌悬液,将对数生长期的表皮葡萄球菌悬液、金黄色葡萄球菌悬液、大肠埃希菌悬液一式四份分别接种于胰蛋白胨大豆肉汤(Tryptic Soy Broth,TSB)和UW液(University of Wisconsin solution),并分别在4℃和37℃的条件下培养24小时,对比分析各种细菌的生长情况,了解温度及培养液本身对细菌生长的影响。以同样的方法将三种细菌暴露于分别加有浓度为0~1000μg/mL的头孢唑啉或头孢曲松的UW液,并分别在4℃和37℃的条件下培养24小时,对比分析各种细菌的生长情况,了解头孢菌素的抗菌效果。为模拟程序化条件(细菌由器官保存液到人体的情况),将表皮葡萄球菌接种于加有0~1000μg/mL的头孢唑啉的UW液在4℃下培养20小时,此后弃去UW液保留菌株用胰蛋白胨大豆肉汤冲洗菌株3遍去除头孢唑啉并加入同体积的胰蛋白胨大豆肉汤,在37℃培养至第44小时,观察细菌生长情况。通过细胞生存力实验及半胱天冬酶活性实验检测头孢唑啉对猪肾脏内皮细胞的毒性。结果:未加头孢菌素的情况下,在低体温(4℃)下,培养24小时,三种细菌在胰蛋白胨大豆肉汤中生长缓慢,细菌增量不明显,而在UW液中,三种细菌几乎未见生长,菌量与接种前几乎持平;在常温(37℃)下,培养24小时,三种细菌在胰蛋白胨大豆肉汤生长迅速,三种细菌在UW液中,前18小时细菌总量缓慢下降,18小时后细菌总量出现轻微上升。浓度为1000μg/mL的头孢唑啉展现出对表皮葡萄球菌完全的杀菌作用,即使在头孢唑啉撤除一段时间的情况下,表皮葡萄球菌也不会进入生长阶段。最后,浓度为1000μg/mL的头孢唑啉对猪肾脏内皮细胞并无不利影响,猪肾脏内皮细胞的生存力未见明显下降。结论:低温(4℃)会降低头孢唑啉的杀菌效率,但加入大剂量(1000μg/mL)头孢唑啉的UW液,其内细菌总量在12小时内会降至观察低限(10~2cfu/ml),未加大剂量头孢唑啉的UW液中,细菌虽不会出现大量增长,但细菌会长期存在,细菌一旦接触到适宜条件则会复苏并大量增殖,并且加入大剂量头孢唑啉的UW液并未降低其肾脏保存效果。基于这些发现,大剂量头孢唑啉可在低温器官保存中预防应用以降低器官保存液细菌污染,降低器官保存液污染引起的患者器官移植术后感染的发生率。
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