滑子菇多糖的分离纯化与结构分析

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滑子菇(Pholiota nameko)又称珍珠菇,隶属真菌门,担子菌亚门、担子菌纲、伞菌目、丝膜菌科、鳞伞属。滑子菇富含多种营养物质,如蛋白质、脂质、维生素以及多糖等。多糖作为滑子菇中重要的活性物质之一,能够抑制癌细胞增殖、抵抗衰老及调节免疫等生物活性。目前关于滑子菇多糖的研究主要集中在提取工艺、保健食品开发以及生物活性等方面,对滑子菇多糖结构的研究较少。为了深入了解滑子菇中多糖的类型及结构特征,设计了本论文的研究内容,具体研究结果如下:以新鲜的滑子菇为实验原料,经热水煮提、醇沉干燥后,得到滑子菇多糖WPNP,得率为0.8%(相对于湿重得率)。WPNP的总糖含量为68.3%,蛋白质含量为8.6%,盐分含量为6.4%,糖醛酸含量为6.4%。单糖组成分析的结果表明WPNP主要由Gal(54.2%)和Man(26.5%)组成,此外,还含有Glc(7.3%)和GlcA(6.6%)以及少量Xyl(6.1%)和Me-Gal(2.4%)组成。使用DEAE-Cellulose离子交换层析柱对WPNP进行分级,得到蒸馏水洗脱的级分WPNP-N和0.5 M NaCl洗脱的级分WPNP-A。WPNP-N主要由Gal(65.1%)和Man(24.2%)构成。WPNP-A主要由Man(56.1%)、Xyl(24.1%)及GlcA(10.9%)构成。进一步使用凝胶柱层析Sepharose Cl-6B对其进行纯化,分别得到WPNP-N-b和WPNP-A-a两种主要的均一级分。经分子量测定、单糖组成分析、甲基化分析以及核磁共振等结果表明,WPNP-N-b主要由Gal(58.1%)和Man(33.9%)构成,分子量为1.4×10 Da,其结构以α-1,6-D-Galp为主链,此外还存在少量α-1,6-O-Me-D-Galp结构,在部分Gal的O-2位发生取代,侧链结构由t-β-D-Manp构成。WPNP-A-a主要由Man(61.9%)、Xyl(20.4%)和GlcA(14.2%)构成,其分子量为1.1×10 Da,WPNP-A-a主链以1,3-Man的甘露聚糖为主链,在O-2和O-6位上连接有末端t-Xyl。
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