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目的：
研究温州地区临床分离的产新德里金属β内酰胺酶-1(New Delhimetallo-beta-laetamase-1，NDM-1)多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药机制及其流行特性，为临床抗感染治疗、院内感染管理与控制提供理论依据。
方法：
1.回顾性研究2005年1月～2010年12月间温州医学院附属第一医院、温州医学院附属第二医院、温州市二医院、温州市中西医结合医院临床分离鲍曼不动杆菌的耐药情况;
2.产NDM-1菌株检测:通过PCR扩增并测序研究菌株中blaNDM-1基因，确定产NDM-1菌株;
3.产NDM-1菌株耐药表型及耐药性研究:通过CHROMagar ESBLs显色琼脂、改良Hodge试验和EDTA增效实验检测产NDM-1菌株的耐药表型;通过琼脂稀释法测定产NDM-1菌株对头孢菌素类、碳青霉烯类、单β-内酰胺环类、氟喹诺酮类、氨基糖苷类、四环素类和多黏菌素类抗菌药物的最低抑菌浓度;
4.耐药基因携带情况研究:通过PCR扩增并测序上述产NDM-1菌株中编码广谱及超广谱β内酰胺类酶、A类碳青霉烯酶、B类碳青霉烯酶、D类碳青霉烯酶、头孢菌素酶、16S rRNA甲基化酶、氨基糖苷类修饰酶和四环素外排泵相关基因;
5.耐药基因水平转移研究:通过接合转移试验研究产NDM-1菌株所携带的耐药基因水平转移情况;通过构建不同温度条件研究温度因素对blaNDM-1基因转移效率的影响;通过对接合转移试验中获取的阳性接合子研究blaNDM-1基因的稳定性;
6.菌株流行性研究:回顾性调查产NDM-1阳性菌株来源病人的临床资料，研究患者住院期间的接触可能性;通过脉冲场凝胶电泳分析与产NDM-1菌株同年度同病区分离鲍曼不动杆菌的同源性，研究携带有blaNDM-1鲍曼不动杆菌菌株在院内的流行特性;通过多位点序列分型分析对携带blaNDM-1鲍曼不动杆菌菌株进行分型研究，同时与Pubmlst数据库已报道菌株进行对比分析，了解本研究中产blaNDM-1鲍曼不动杆菌菌株与全球流行株的相关性。
结果：
1.2005年～2010年间温州四家医院临床分离756株鲍曼不动杆菌对第三代头孢菌素类、碳青霉烯类、氟喹诺酮类抗菌药物均具有较高的不敏感性;
2.检出产NDM-1阳性鲍曼不动杆菌2株，均为温州医学院附属第一医院临床分离株（菌株编号为B2214和B2226），CHROMagar ESBLs显色琼脂检测为阴性、改良Hodge试验和EDTA增效实验检测均为阳性;
3.产NDM-1鲍曼不动杆菌对第三代头孢菌素类抗生素、碳青霉烯类抗生素、单β-内酰胺环类抗生素、四环素类抗生素和庆大霉素高度耐药，而对氟喹诺酮类抗菌药物、多黏菌素类抗生素以及妥布霉素敏感;
4.PCR检测发现2株产NDM-1鲍曼不动杆菌同时携带有blaIMP-1、blaOXA-23-like、blaOXA-51-like、blaADC、tetA和tetB基因;
5.接合转移实验发现blaNDM-1及tetA可通过接合转移的方式从原始菌株转移至大肠杆菌J53受体菌中（接合子命名为J-B2214和J-B2226），同时菌株的接合转移效率受温度影响，在37℃条件下的转移效率较高，所获得的接合子在无抗生素的条件下极不稳定，易丢失耐药基因;
6.临床资料回顾发现B2214和B2226菌株的携带者在住院期间可能存在接触史，脉冲场电泳分析发现B2214和B2226为同一克隆型，同时多序列位点分型分析发现B2214和B2226均属于首次发现的ST435型鲍曼不动杆菌;
结论：
1.本研究中2005年～2010年间温州地区临床分离鲍曼不动杆菌对多种抗菌药物耐药情况严重;
2.携带多种耐药相关基因是本研究中产NDM-1多重耐药鲍曼不动杆菌属对多种抗菌药物高度耐药的主要原因;
3.本研究中的2株产NDM-1鲍曼不动杆菌为同一克隆型且属于首次发现的ST435型，菌株间存在克隆传播的可能;
4.blaNDM-1基因可通过接合转移的方式从不动杆菌属转移至肠杆菌科细菌，提示blaNDM-1存在跨种属间传播的危险性;
5.本研究中携带有blaNDM-1基因的接合子在具有抗生素压力的条件下可以稳定存在，同时在37℃条件下接合转移效率最高，提示在医院环境下产NDM-1菌株具有很高的流行传播风险。