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目的 面神经麻痹后将引起一系列面肌瘫痪症状,面肌的机能和组织学都将随着时间的不同而发生不同程度的病理变化。但是,目前对面神经麻痹的研究也多只限于对面神经本身的观察,而对与面神经共同构成一个完整运动单位所必需的重要组成部分——面肌却很少重视。口轮匝肌是面肌中比较有代表意义的一块肌肉,也是临床上早期预后诊断的重要检查部位。本文从酶组织化学角度对面神经失神经支配后口轮匝肌琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase,SDH)、乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AchE)及Ca2+-ATP酶(Ca2+-ATPase)进行了光、电镜观察及计算机定量分析,并探讨面神经不同程度失神经支配后口轮匝肌琥珀酸脱氢酶,乙酰胆碱酯酶,Ca2+-ATP酶的光镜及电镜变化,及失神经支配对口轮匝肌线粒体、三联体及运动终板形态和超微结构的影响,旨在对面神经失神经支配后面肌的能量代谢、结构及肌细胞的病理变化作一基础研究,并对临床工作进行指导及提供理论依据。 方法 制造豚鼠面神经麻痹模型,分为面神经压榨15s组、30s组、切断组,每组再分为1周组、1月组,并进行如下观察:(1)琥珀酸脱氢酶染色后,光镜及透射电镜观察各组口轮匝肌线粒体结构和琥珀酸脱氢酶阳性产物的变化。(2)采用琥珀酸脱氢酶和乙酰胆碱酯酶结合酶组织化学染色方法,并应用LUZEX-F计算机图象分析系统测试各组肌纤维乙酰胆碱酯酶含量的灰度值。通过透射电镜观察各组运动终板结构和乙酰胆碱酯酶阳性反应产物的变化。(3)光镜观察采用Ca2+-ATP酶酶组织化学染色方法,并应用LUZEX-F计算机图象分析系统测试各组肌纤维Ca2+-ATP酶酶含量的灰度值,对所得数据进行两样本均数差别的t检验。通过透射电镜观察各实验组三联体结构和 Ca卜-ATP酶阳性反应产物的变化。 结 果 根据滤拍酸脱氢酶呈色反应程度及酶反应颗粒的多少,可将口轮匝肌的肌纤维分为二种类型,即红肌纤维和中间型肌纤维。红肌纤维呈深蓝色,酶颗粒较多,一般直径较小;中间型肌纤维呈蓝色,酶颗粒较少,直径多较大。面神经失神经支配后一周口轮匝肌滤琅酸脱氢酶呈色反应程度减弱,其减弱程度:断组>压榨 30秒组>压榨 15秒组k<0.01人在 15秒组,二型肌纤维掳拍酸脱氢酶染色均有所减弱,肌纤维萎缩,有的肌纤维形状略不规则;在30秒组,二型肌纤维酶活性下降较明显,部分中间肌肌纤维染色已稍不清晰;在断组,二型肌纤维染色明显减弱,酶反应颗粒明显减少,并有扩散现象。一个月后有所恢复,其恢复程度:压榨15秒组>压榨3o秒组。电镜下,藐拍酸脱氢酶阳性反应产物为高电子密度颗粒,定位于线粒体的内外膜上以及内外膜间腔内。面神经损伤后二周,口轮匝肌线粒体结构破坏,阳性反应颗粒稀疏。在 15秒组可见酶反应颗粒有所减少;在 30秒组,线粒体部分峪断裂,SDH阳性反应产物减少较明显;在断组,线粒体大部分崎断裂甚至消失,酶反应颗粒非常稀疏。面神经损伤后1月,口轮匝肌线粒体结构及**H酶活性均有所恢复,其恢复程度:压榨匕秒组>压榨3O秒组。在15溅,线粒体结构及酶反应颗粒已基本恢复正常;在30秒组,线粒体仍有部分峪断裂,酶反应颗粒较稀疏。面神经失神经支配后乙酚胆碱酯酶酶活性亦减弱,其灰度值为:1551周组为 60.4545 i 4.3561;3051周组为65.1818 ti.2194,与 15sl 周组间差异有显著性(p<0.01);断组 1周组为72.8926土7.3511,与 30SI 周组间有显著性差异(p<0.01)。15sl月组为62.8“1 t7.8189,3051月组为 64.4570。2.2539,两组间差异显著(p<0.of人 电镜观察切断1周组运动终板突触数目减少,损伤明显;15sl月组运动终板和乙酚胆碱酯酶阳性反应产物恢复明显;3051月组有轻度恢复。面神经失神经支配后一周口轮匝肌Cah-ATP酶酶活性减弱,其损伤程度:断组>压榨30秒组>压榨15秒组;一个月后有所恢复,其恢复程度:压榨15秒组>压榨3O秒组。电镜观察可见口轮匝肌三联体结构破坏,面神经损伤越重,三联体结构破坏越严重。 ·2· 结 论 正常情况下,口轮匝肌在面神经的支配下进行收缩进而与其它面肌相配合以完成各种面部表情动作。失神经支配后,面神经与口轮匝肌失去了正常的联系,导致肌纤维内部结构受损,能量代谢降低,各种生理功能受影响。掳琅酸脱氢酶催化三竣酸循环中滤琅酸与延胡索酸之间的反应,并且是瑰琅酸氧化呼吸链中最重要的酶之一,它主要存在于线粒体中,分布在线粒体的内外膜上及内外膜间腔内,是线粒体的标志酶。通过对骁琅酸脱氢酶的光、电镜观察可以同时了解肌纤维的有氧代谢能力、供能水平及线粒体超微结构的变化。运动终板是神经与肌肉之间相连的特有结构。神经-肌肉接头是典型纯胆碱能神经传导,神经发放的冲动只有通过运动终板才能将神经递质-乙酚胆碱传递给肌肉,从而引起肌肉收缩运动。乙酚胆碱酯酶对乙酞胆碱有特异性?