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目的:人GL15神经胶质瘤细胞FAK-ras/MAPK信号通路是整合素αvβ3参与调控的信号转导通路之一,在胶质瘤细胞的众多生物学行为中起关键作用。IS201为目前一种强力整合素αvβ3的拮抗剂,可特异性识别整合素RGD序列并与之结合,从而通过干扰整合素对其介导的信号传导予以影响。本实验着重研究IS201作用于GL15胶质瘤细胞表面的整合素αvβ3后,对该细胞FAK-ras/MAPK信号通路中重要蛋白的表达量以及磷酸化的影响,从而在一定程度上对肿瘤细胞的侵袭予以抑制,为肿瘤细胞的治疗提供帮助。方法:(1)人工培养GL15神经胶质瘤细胞,将不同浓度(0mg/L、20mg/L和40mg/L)的IS201加入DMEM培养液中。孵育16小时后收集样品、裂解物。(2) Western Blotting实验:将样品行SDS-PAGE,电转移于PVDF膜上,封闭液室温封闭,依次加入一抗(抗FAK多克隆抗体1:1000稀释;FAK磷酸化抗体1:1000;MMP-2抗体1:1000稀释;ERK1/2磷酸化抗体1:1000稀释)和辣根过氧化酶标记的羊抗兔二抗后显影,肌动蛋白作为蛋白质上样量的标定。(3)建立Transwell模型板,培养12h,使细胞穿透Matrigel胶和PET膜上的微孔,达到PET膜的下表面。然后细胞固定、染色和侵袭细胞数的计算。结果:(1)不同浓度的IS201均可明显抑制FAK的表达(*P<0.05)及FAK磷酸化(*P<0.05),并且随着IS201浓度升高,其对FAK表达及其磷酸化的抑制呈增高趋势。(2)加入IS201的各实验组,ERK1/2的表达明显降低(*P<0.05),随着IS201浓度增加,其对ERK1/2表达的抑制呈增强的趋势。(3)不同浓度IS201对MMP-2的表达均有明显抑制作用(*P<0.05),随着IS201浓度增加,其对MMP-2抑制作用呈增强趋势。(4)不同浓度下IS201对GL15细胞侵袭性均有抑制作用,随着IS201浓度增加,对其抑制作用呈增强趋势。结论:整合素αvβ3拮抗剂IS201对GL15神经胶质瘤细胞瘤信号传导通路FAK-ras/MAPK中的FAK的表达及其磷酸化、MMP-2的表达、ERK1/2的表达均表现为剂量性依赖性抑制关系,对GL15细胞的侵袭力有明显抑制作用。