【摘 要】
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对虾白斑综合症病毒（white spot syndrome virus，WSSV）作为Nimaviridae属Whispovirus种中唯一的物种，是对虾的最主要病毒病原之一。它传染力强，致死率高，难防治，并且宿主范围广，能够
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对虾白斑综合症病毒（white spot syndrome virus，WSSV）作为Nimaviridae属Whispovirus种中唯一的物种，是对虾的最主要病毒病原之一。它传染力强，致死率高，难防治，并且宿主范围广，能够感染大部分的甲壳类动物，因而它不仅严重危害对虾养殖，还对海洋环境构成威胁。本论文开展了病毒结构蛋白研究以及鉴定，并了解它们之间的相互作用，这有利于揭示WSSV入侵的分子途径，探索病毒复制或转录过程，为最终建立有效的防治方法提供有力的科学依据。 按本实验室建立的方法从感染螯虾（Procambarus clarkii）组织中大量提取和纯化了完整的白斑综合症病毒粒子。经过1％Triton X-100处理以后，病毒核衣壳蛋白组分可经SDS-PAGE和质谱分析进行鉴定，研究发现三个分子量为51kDa、60kDa和76kDa的蛋白分别是WSSV基因组的开放阅读框（open reading frames，ORFs）中wsv308、wsv415和wsv220的基因产物，这些ORFs分别包含有1398bp、1632bp和2022bp，预测分别编码466、544和674个氨基酸。这三个蛋白分别被命名为VP51、VP60和VP76，它们的基因相应地命名为vp51、vp60和vp76基因。时相转录分析发现，vp51、vp60和vp76都属于病毒感染的晚期基因。 VP51和VP76在之前的研究中对于它们的归属存在争议，为了澄清这个争论，以及对新发现的VP60这个蛋白的定位及功能的研究，本论文设计一系列方案对它们的特征进行测定。首先，三个基因选取部分片段（分别命名为vp51p、vp60p和vp76p），将它们克隆到pET-his或者是pET-GST（vp76p）表达载体，在E．coli BL21（DE3）中与六个组氨酸或谷胱甘肽-S-转移酶（glutathione S-transferase，GST）基因进行融合表达并纯化。纯化的目的蛋白（（His）6-VP51P、（His）6-VP60P和GST-VP76P）
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