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目的研究不同供肺保存方法下猪肺移植术后24h移植肺中TOLL样受体4 (TLR4)的表达,探讨TLR4与肺缺血再灌注损伤的关系,并比较氧合血体外持续灌注法保存供肺是否优于传统低温静态保存方法。方法选用广西巴马小型猪12对,随机分为对照组(4℃低温静态保存供肺8h后行左肺移植,n=6)和实验组(氧合血体外灌注保存供肺8h后行左肺移植,n=6)。1.分别于移植术后0.5h和术后每两小时记录受体猪股动脉和左下肺静脉的P02/FiO2。2.分别于供肺保存前,供肺保存8h,受体麻醉后,移植术后3h、6h、12h、24h: (1)测定受体猪的肺通气阻力(LR);(2)采集肺组织标本,测定肺含水量和透射电镜观察细胞凋亡评估肺组织损伤程度;(3)采用western blot和实时定量PCR检测移植肺组织中TLR4、TLR4 mRNA的表达变化。结果1.股动脉和左下肺静脉的P02/Fi02的变化:肺移植术后12h内两组均逐渐下降,之后至术后24h对照组继续降低,而实验组显著增加(P<0.05);实验组在肺移植术后各时间点均高于对照组(P<0.05)。2.肺通气阻力(LR)和肺含水量的变化:术后12h前两组逐渐升高,之后至术后24h对照组继续增加,而实验组显著下降(P<0.05);实验组在术后各时点均显著低于对照组(P<0.05)。3.透射电镜:两组都在供肺保存8h开始出现细胞凋亡,术后3h、6h均可见各时期的凋亡形态;术后12h时对照组仍可见早期凋亡,而实验组未观察到早期凋亡;在术后24h,两组都以晚期凋亡为主。4.TLR4、TLR4mRNA的变化:与供肺保存前比较,两组在供肺保存8h的TLR4、TLR4mRNA均显著增高,实验组增高更显著(P<0.05);与供肺保存8h比较,两组在术后3h的TLR4、TLR4mRNA表达显著增加,差异有统计学意义(P<0.05);实验组在术后6h的TLR4、TLR4mRNA到达峰值,之后逐渐下调;对照组在术后12h和术后6h间的TLR4、TLR4 mRNA差异无统计学意义(P>0.05),术后24h显著低于术后12h(P<0.05);实验组在肺移植术后各时间点均低于对照组(P<0.05)。结论1.两组在供肺保存8h时即出现肺损伤,低温静态保存法术后24h肺功能持续损害而常温氧合血灌注法在术后12h逐渐好转;2.常温氧合血灌注保存法在肺移植术后24h内TLR4表达始终低于低温静态保存法,与肺损伤的趋势一致,因此常温氧合血灌注保存法可能是一种较好的肺保存技术。