【摘 要】
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研究背景:胰岛素样生长因子1(IGF1)及受体(IGF-1R)是人体内极其重要的促进生长的因子。胰岛素样生长因子1受体通过介导IGF1的活性,从而促进体内细胞的增殖、转移,抑制细胞的
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研究背景:胰岛素样生长因子1(IGF1)及受体(IGF-1R)是人体内极其重要的促进生长的因子。胰岛素样生长因子1受体通过介导IGF1的活性,从而促进体内细胞的增殖、转移,抑制细胞的凋亡,且与肿瘤的发生、发展等有着密切的联系。相关研究表明,通过抑制IGF-1R的活性能有效的控制体内多种肿瘤细胞的增殖、转移,促进肿瘤细胞的凋亡。胰腺癌是人体内消化系统中恶性程度最高的恶性肿瘤之一,其具有病情进展较快、预后差的特点,其5年生存率仅为1%~3%,并且多年来其发病率逐渐呈现上升的趋势。IGF-1R在胰腺癌中亦发挥着促进肿瘤增殖、转移,抑制肿瘤凋亡的作用。本研究采用小分子激酶抑制剂GSK1838705A,通过抑制胰岛素样生长因子1受体的活性,研究其对人胰腺癌细胞增殖、转移和凋亡的影响。研究目的:研究胰岛素样生长因子1受体抑制剂GSK1838705A对人胰腺癌细胞的抗肿瘤作用。研究方法:体外培养获取不同代数的人胰腺癌CAPAN-2细胞;Cell Counting Kit-8(CCK-8)方法检测不同浓度GSK1838705A对胰腺癌CAPAN-2细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测GSK1838705A对胰腺癌CAPAN-2细胞凋亡的影响;Western blot方法检测GSK1838705A作用于胰腺癌CAPAN-2细胞后Bax和Cytochrome c蛋白表达水平的变化;划痕试验观察GSK1838705A处理CAPAN-2细胞后对细胞增殖和迁移的影响;Caspase-3和Caspase-9检测试剂盒测定细胞凋亡。研究结果:CCK-8检测结果表明不同浓度的GSK1838705A能够不同程度的抑制人胰腺癌CAPAN-2细胞的增殖,当药物浓度达10μM时,其细胞抑制率可达98.29%;流式结果显示,GSK1838705A可诱导CAPAN-2细胞发生凋亡,且随着GSK1838705A浓度的增加,诱导凋亡作用增强,当药物浓度为10μM时,有超过50%的细胞发生凋亡;Western blot结果显示,Bax和Cytochrome c蛋白表达水平升高;划痕试验结果表明,不同浓度的GSK1838705A能够不同程度的抑制胰腺癌CAPAN-2细胞的增殖和迁移;且当药物浓度为5μM时,在镜下可明显看到凋亡小泡,细胞更容易脱落;Caspase-3和Caspase-9凋亡检测试剂盒说明GSK1838705A对胰腺癌CAPAN-2细胞有诱导凋亡的作用,且呈现浓度依赖性。研究结论:胰岛素样生长因子1受体抑制剂GSK1838705A在体外可显著抑制人胰腺癌CAPAN-2细胞的增殖,诱导细胞凋亡并抑制细胞迁移,在人胰腺癌细胞中发挥着显著的抗肿瘤作用。
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