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目的: 黑质-纹状体多巴胺系统和胆碱能系统之间的功能失衡会引起帕金森氏病(Parkinsons disease,PD),此病的运动系统功能障碍为最大特点。人类及动物的运动和平衡能力在很大程度上是由前庭功能调控的。研究表明,PD患者伴有前庭功能减退者明显多于正常人,同时PD模型动物前庭神经核(vestibularnuclear,VN)内谷氨酸的含量和受体发生改变。这可能是患有帕金森的病人出现无法阻止性的震颤以及运动失衡的原因之一。最近发现,适当的刺激作用于前庭器官可以改善PD患者或模型动物的运动功能,而且VN可以通过束旁核间接地与纹状体发生突触联系。但是前庭神经系统与束旁核、黑质、纹状体间的功能联系尚无研究报道。本次实验通过大鼠实验,拟用前庭电刺激结合免疫组化、药理学等方法,观察大鼠脑内的神经核团情况,主要核团有前庭内侧核、丘脑束旁核、黑质、纹状体,观察这些区域核团的c-Fos蛋白表达情况。探讨前庭器官与基底神经节之间的功能联系及其神经化学和受体机制。 方法: 本研究选用体重250g~300g的清洁级SD雄性大鼠。首先用水合氯醛(300mg/kg)进行麻醉,进行外科手术,皮肤表面消毒后沿耳缘进行切口剪开,用微型电钻磨平耳鼓表面,暴漏水平半规管,沿着水平半规管的方向向壶腹嵴处插入尖端裸露的漆包线电极,牙科水泥固定,通过此方法将电极插入外周前庭器官后进行刺激外周前庭器官。分成两大组:空白对照组、实验组。空白对照组大鼠取6例,将刺激电极植入大鼠前庭器官后不给与电刺激。实验组包括前庭神经内侧核(Medial vestibular nucleus,MVN)组、束旁核(Parafascicularis,PF)组、纹状体(Caudate putamen,CPu)组、黑质(Substantia nigra,SNR)等4个组,每组6例,共24例。各组大鼠前庭器官植入电极,随后给予电刺激。根据刺激后动物的动眼反应寻找最佳的刺激参数后,在最佳刺激条件下,利用免疫组织化学的方法观察大鼠前庭内侧核、丘脑束旁核、黑质和纹状体区c-Fos蛋白表达的变化;寻找最佳的刺激参数和变化最明显的蛋白表达,并记录下来。 结果: 1.最佳刺激参数是电流强度:1mA;频率:50Hz;延迟:0.1ms;波宽:1.0ms;时间:3min。 2.通过最佳刺激参数刺激大鼠外周前庭器官后,统计观察对前庭神经内侧核区c-FOS蛋白表达的影响。刺激外周前庭器官后,前庭神经内侧核区c-Fos蛋白阳性神经元表达数目由对照组的5.72增加到34.80,经过SPSS软件分析,组间比较差异显著,具有统计学意义(P<0.05,n=6); 3.刺激外周前庭器官束旁核区c-Fos蛋白表达明显增多(由对照组7.93增加到85.76),与对照组比较有统计学意义(P<0.05,n=6); 4.刺激外周前庭器官也能使纹状体区c-Fos蛋白表达(37.92)明显多于对照组(4.98)(P<0.05,n=6); 5.刺激外周前庭器官对黑质区c-Fos蛋白表达没有明显影响,无显著性差异(P<0.05,n=6) 结论: 1.刺激外周前庭器官,引起基底神经节功能改变的最佳刺激参数是电流强度:1mA;频率:50Hz;延迟:0.1ms;波宽:1.0ms;时间:3min。 2.刺激外周前庭器官,不仅影响MVN的c-Fos蛋白阳性神经元的表达,同时也可以改变PF和CPu的神经元活动。