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[目的] 内皮细胞(endothelial cell EC)是血管新生的基础,促进血管新生已经成为当前的研究热点和治疗缺血性疾病的新策略。本研究尝试建立脐血内皮前体细胞体外诱导分化的培养体系,寻找有效的诱导分化因子组合,以证实脐血中存在内皮前体细胞(endothelial cell precursor EPC),探讨人脐血干细胞(Human umbilical cord blood stem cells HCBSCs)用于治疗缺血性疾病的可行性。[方法] 采用足月妊娠、正常分娩的新鲜脐血,收集单个核细胞(mononuclear cell MNC),应用血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor–basic bFGF)、胰岛素样生长因子-I(insulin-like growth factor-I IGF-I)的组合,或单独应用植物血球凝集素M型(phytohaemagglutinin PHA M)作为分化诱导因子进行体外培养,在倒置显微镜下动态观察细胞生长分化的情况,应用流式细胞仪检测培养细胞的vWF表达并在电镜下观察内皮细胞特异的Weibel-Palade小体(W-P小体)。[结果] 从脐血中分离出来的单个核细胞是圆形小细胞,应用VEGF等细胞因子组合诱导分化的实验组在培养24小时后胞体增大,形态也逐渐发生改变,开始呈贴壁生长,第5天即可出现典型的梭形细胞且数量随着培养时间的延长而增加,第14天达到高峰。应用流式细胞仪检测培养细胞的vWF表达率可达到80%以上,电镜观察发现在胞浆中有内皮细胞特异的Weibel-Palade小体。应用PHA诱导分化24小时后细胞聚集成团,培养8天后,即可见到大量典型梭形贴壁细胞生成。应用流式细胞仪检测培养细胞的vWF表达率可达到60%以上,电镜观察也可发现在胞浆中有内皮细胞特异的Weibel-Palade小体。无PHA及VEGF的对照组可见明显的细胞死亡。[结论] ① 脐血中存在内皮前体细胞,分离得到的单个核细胞能在体外定向诱导分化形成内皮细胞。②VEGF是体外诱导内皮细胞产生的关键因子,应用bFGF和<WP=4>IGF-I不能将脐血单个核细胞诱导分化为内皮细胞,但是bFGF及IGF-I联合应用能与VEGF起协同作用。③证实PHA能诱导脐血单个核细胞分化为内皮细胞,而且能缩短体外诱导分化的时间,但是诱导效率低于细胞因子组。④脐血有望成为治疗缺血性疾病的一种有效的干细胞来源。