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背景和目的:脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)是一种威胁人类生命安全的灾难性疾病,且目前仍缺乏有效的针对性治疗措施。脑实质血管破裂后血液成分进入脑组织,形成血肿并对周围组织造成压迫和机械性损伤。血液成分及受损的脑细胞触发脑内固有免疫或适应性免疫应答,血肿周围的小胶质细胞首先被激活,释放多种促炎因子(IL-1β,IL-6,TNF-α)、趋化因子及活性氧等,随后外周白细胞如淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞等迁移浸润脑组织,在病灶周围聚集、增殖并释放多种促炎介质,加重脑水肿、血脑屏障破坏及神经元的坏死和凋亡,导致严重而持久的脑组织损伤。激活蛋白-1(activator protein-1,AP-1)是细胞内一类转录因子复合物,在细胞增殖、分化和凋亡中起重要作用。AP-1由Jun家族和Fos家族亚基组成,以同源或异源二聚体形式存在,是炎症通路中的重要靶点,通过调节下游多种炎性因子应对外界环境的刺激。SR11302是一种AP-1活性抑制剂,可以减少脑内AP-1的蛋白水平。通过诱导2种小鼠脑出血模型及使用SR11302抑制AP-1活性,证明抑制AP-1有助于改善脑出血小鼠神经功能结局,并进一步探索AP-1参与脑出血后神经炎症的可能机制。方法:实验对象为成年雄性C57BL/6小鼠,以自体血注射及胶原酶注射2种方法制备脑出血模型,假手术组以相同手术方式注入与自体血或胶原酶等体积的生理盐水。实验组小鼠脑出血模型诱导前1h颅内注射AP-1抑制剂SR11302(100mmol/L,1μl),对照组小鼠注射相同体积二甲基亚砜。通过流式细胞术检测脑出血后脑组织AP-1的表达和分布(小胶质细胞、神经元和星形胶质细胞),Rt-PCR技术检测脑出血后脑内AP-1(c-Jun,c-Fos)以及促炎因子(IL-1β,IL-6,TNF-α)的动态变化;根据上述检测结果提示,应用免疫荧光技术验证脑出血后小胶质细胞水平AP-1的表达;模型建立成功后的第1天及第3天,通过m NSS评分及转角实验评估小鼠脑损伤程度;模型建立成功后的的第3天,通过干湿重法检测脑含水量;通过流式细胞术检测小鼠脑出血24h后脑内浸润的炎性细胞(包括T细胞、中性粒细胞和自然杀伤细胞)和小胶质细胞数量,并检测由小胶质细胞表达的IL-6及TNF-α;体外单独培养小胶质细胞并给予凝血酶刺激,检测经SR11302或溶剂处理后IL-6或TNF-α阳性的小胶质细胞数量。结果:(1)在脑出血6小时后,小鼠脑组织AP-1表达明显上调,以小胶质细胞AP-1表达增高最显著,随后促炎因子分泌水平上调,包括IL-6、IL-1β和TNF-α。(2)给予AP-1抑制剂SR11302后,可以明显减轻小鼠脑出血后神经功能损伤程度和脑水肿体积,并降低小鼠脑出血后的死亡率。(3)接受SR11302治疗可以减少小鼠脑出血后脑内小胶质细胞的数量,此外还减少了中枢神经系统外周白细胞(包括中性粒细胞、T淋巴细胞及自然杀伤细胞)的浸润。(4)给予SR11302治疗后可以明显抑制小鼠脑出血后小胶质细胞分泌的IL-6和TNF-α,同时在体外单独培养的小胶质细胞中,给予SR11302治疗减少了经凝血酶刺激后小胶质细胞分泌的IL-6及TNF-α。结论:抑制AP-1可以减轻小鼠脑出血后神经炎症反应,减少脑水肿体积,改善神经功能损伤程度,最终减轻脑出血诱发的脑损伤。因此,抑制AP-1作为脑出血后的潜在治疗靶点具有进一步研究的价值。