【摘 要】
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目的:本研究拟构建CD14-shRNA慢病毒载体,建立CD14稳定低表达的胃癌细胞系,探讨 CD14-shRNA慢病毒载体转染胃癌 SGC-7901细胞后CD14的mRNA及蛋白的表达情况。 方法:将CD14
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目的:本研究拟构建CD14-shRNA慢病毒载体,建立CD14稳定低表达的胃癌细胞系,探讨 CD14-shRNA慢病毒载体转染胃癌 SGC-7901细胞后CD14的mRNA及蛋白的表达情况。 方法:将CD14-shRNA慢病毒载体转染胃癌SGC-7901细胞,以最佳感染指数(MOI)转染胃癌 SGC-7901细胞后,用 Real-timePCR和Westernblot分别检测空白对照组、NCshRNA阴性对照组和CD14shRNA慢病毒载体组的CD14mRNA和蛋白质的表达。 结果:将CD14-shRNA慢病毒载体成功转染至胃癌细胞系,RT-PCR结果显示转染CD14shRNA慢病毒组CD14的△Ct值比NCshRNA对照组增高(p=0.000;P<0.001),其CD14的2?△△Ct值比NCshRNA对照组降低(p=0.0001;P<0.001),差异有显著统计学意义;Western blot检测结果显示,CD14shRNA慢病毒载体组细胞的CD14蛋白表达相对于空白组及阴性对照组明显减少,从灰度值分析显示看出,CD14shRNA慢病毒组CD14蛋白相对表达量(0.01)远远小于空白组(1.0)及阴性对照组(0.83)。 结论:成功将CD14shRNA慢病毒载体转染至胃癌SGC7901细胞, CD14shRNA慢病毒载体转染至胃癌 SGC790细胞后能抑制胃癌细胞CD14的mRNA及蛋白的表达。
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