中华眼镜蛇神经毒素抗类风湿性关节炎的药效学研究

• 作 者: 朱琪
• 机 构: 苏州大学
• 出 处: 苏州大学
• 发表日期: 2016年01期
• 关键词: 中华眼镜蛇神经毒素 抗炎 类风湿性关节炎 成纤维样滑膜细胞 NF-κB

目的:确定中华眼镜蛇神经毒素(Cobrotoxin,CTX)在不同炎症模型中的抗炎作用,进而研究CTX对类风湿性关节炎的抑制作用及其可能的机制。方法:利用小鼠足底注射甲醛致炎实验、小鼠腹腔炎性渗出实验以及大鼠纸片肉芽肿实验确定CTX的抗炎作用;利用佐剂型关节炎(Adjuvant-induced arthritis,AA)大鼠模型研究CTX的抗类风湿性关节炎作用:用关节炎评分、足肿胀、关节病理作为抗关节炎的药效学指征,同时用CCK-8法检测T淋巴细胞体外增殖能力,用流式细胞仪检测大鼠外周血中的CD4和CD8不同T细胞亚群水平的改变,用ELISA试剂盒检测血清IL-6、TNF-α、IL-1β水平,血液学分析仪检测外周血中的炎性细胞数。此外,我们通过原代培养AA大鼠成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLSs),检测了细胞给药后FLSs的增殖能力以及NF-κB的核转位情况。结果:在3种炎性模型中,CTX一定程度上抑制了足底注射甲醛引起的小鼠足肿胀、腹腔注射醋酸引起的毛细血管通透性改变这两种经典的急性炎症反应,并较为明显地抑制了大鼠肉芽肿的生成这一慢性炎症反应。在AA大鼠模型中,CTX给药后大鼠关节炎评分、足肿胀程度较模型组降低,关节病理情况好转;CTX抑制了由于造模引起的T淋巴细胞的大量增殖以及异常升高的CD4/CD8水平,具有抑制异常增高的免疫反应的作用;此外,CTX抑制了AA大鼠血清中炎症因子IL-6、TNF-α、IL-1β的水平、炎性细胞的数量以及体外实验FLSs的增殖和NF-κB的核转位。结论:CTX对不同炎症模型都有一定的抑制作用,且对慢性炎症的影响较为明显。CTX具有良好的抗炎和免疫抑制作用,可缓解AA大鼠病情,可能成为治疗类风湿性关节炎的候选药物。