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目的本课题旨在通过一种mTOR信号通路特异性抑制剂雷帕霉素(Rapamycin, RAPA)对人视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞株进行处理后,观察雷帕霉素对HXO-RB44细胞体外抗增殖及细胞周期影响,并初步探讨其分子机制。方法不同浓度(0.0.625、1.25、2.5、5、10、20nmol/L)RAPA处理人视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞株,应用MTT法测定药物处理48h后细胞生长存活率及抑制率；流式细胞仪进行细胞周期、凋亡率的分析；实时荧光定量PCR技术检测药物处理前后mTOR的mRNA水平差异；Western blot技术检测药物处理前后mTOR蛋白以及p-mTOR蛋白水平的差异。结果(1) RAPA处理48h的HXO-RB44细胞株,随着药物浓度的增加细胞生长抑制率增高,细胞生存率下降,与对照组相比,0.625nM实验组差异无统计学意义(P>0.05),其余实验组差异有统计学意义(P<0.01)。(2) HXO-RB44细胞株在RAPA的作用下,随着药物浓度的增加细胞凋亡率增高,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01),且0.625nmol/L实验组的G1期细胞增加,S期的细胞减少,G1期细胞比例,与对照组比较,差异具有显著统计学意义(P<0.01)。(3)实时荧光定量显示随着药物浓度的增加HXO-RB44细胞株mTORmRNA的表达量与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。(4) Western blot法检测显示随着药物浓度的增加HXO-RB44细胞株mTOR蛋白的表达量下降,与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),实验组(2.5、5nmol/L)P-mTOR蛋白表达量与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),而(0.625、1.25nmol/L)实验组P-mTOR蛋白表达量与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论(1) RAPA能抑制HXO-RB44细胞株生长及增殖。(2)流式细胞检测结果提示RAPA抑制HXO-RB44细胞株生长及增殖的机制可能主要是抑制了细胞周期进展,将细胞阻滞G1期,且诱导了细胞凋亡。(3)RAPA不能直接影响HXO-RB44细胞株(?)mTOR蛋白和mRNA的表达。(4) RAPA(?)(?)抑制HXO-RB44细胞株p-mTOR蛋白表达。(5)上述结论为RAPA靶向治疗视网膜母细胞瘤打下良好的实验基础。