论文部分内容阅读
目的:检测IL-23和IL-17在IgAN大鼠中的表达,探讨1,25-二羟维生素D3对Ig AN大鼠中IL-23/IL-17轴的调节作用。方法:购买52只Wistar大鼠,随机选取42只大鼠制作IgA肾病模型,采用抗原直接刺激食管胃粘膜内皮细胞后激活巨噬细胞的方法。剩余10作为正常对照组(A组),在制作IgAN大鼠期间给予相同剂量的蒸馏水灌胃+生理盐水尾静脉注射。第8周经病理免疫荧光法检测Ig AN造模成功后剔除死亡大鼠,将造模成功的IgAN大鼠随机分为模型组(B组)、1,25二羟维生素D3治疗组(C组)、强的松治疗组(D组)、联合治疗组(E组),分别给予强的松(醋酸泼尼松)(10mg/kg/d)及1,25-二羟维生素D3(10ng/100g/d)灌胃,模型组(B组)及正常对照组(A组)给以同等剂量蒸馏水灌胃。2周后检测24h尿蛋白定量,尿红细胞计数,血肌酐、血磷、血钙值;RT-PCR法测定脾脏组织中IL-23mRNA、IL-17mRNA变化,免疫组化法检测大鼠肾脏组织中IL-17、IL-23的变化。结果:(1)24小时尿蛋白定量(mg/24h):A组(正常对照组)为7.01±0.23;B组(模型组)为51.16±2.12;C组(1,25(0H)2D3组)为26.15±1.97;D组(强的松组)为12.99±1.52;E组(联合治疗组)为9.89±1.60;B组24h尿蛋白定量较A组增加,且差异具有统计学意义(p<0.05),经治疗处理后C、D、E组24h尿蛋白较模型组(B组)均有下降(p<0.05),其中E组下降最显著。(2)尿红细胞计数(个/ul):a组为2.3±1.40;b组为375±16.68;c组为157±20.7;d组为20±3.37;e组为7±2.96;b组尿红细胞计数较a组增加,且差异具有统计学意义(p<0.05);治疗组c、d、e组较模型组(b组)尿红细胞计数均有下降(p<0.05),其中e组下降最明显。(3)各组大鼠血肌酐水平(μmol/l):a组为45.08±1.82;b组为44.56±1.16、c组为44.18±2.0、d组为43.57±1.5、e组为43.39±1.65。各组大鼠血钙(mmol/l)水平:a组为2.22±0.13、b组2.36±0.19、c组2.36±0.15、d组2.33±0.19、e组2.29±0.12。各组大鼠血磷(mmol/l)水平:a组为2.81±0.09、b组为2.83±0.19、c组为2.71±0.12、d组为2.72±0.11、e组为2.80±0.15。各组大鼠血肌酐、血钙、血磷的水平未见显著变化,差异无统计学意义(p>0.05)。(4)il-23平均光密度值:a组为0.038±0.009;b组为0.377±0.021;c组为0.264±0.011;d组为0.162±0.009;e组为0.101±0.016;b组(模型组)il-23平均光密度值较a组(正常对照组)上升,且差异具有统计学意义(p<0.05);经治疗处理后c、d、e组il-23平均光密度较b组均有下降(p<0.05),其中e组下降最显著;il-17平均光密度值:a组为0.027±0.011;b组为0.322±0.016;c组为0.265±0.015;d组为0.137±0.012;e组为0.089±0.015;b组(模型组)il-17平均光密度值较a组(正常对照组)上升,且差异具有统计学意义(p<0.05);经治疗处理后c、d、e组il-17平均光密度较b组均有下降(p<0.05),其中e组下降最显著;各组大鼠肾组织中il-23表达与il-17表达正相关性(p<0.05);各组il-23和il-17的表达与24尿蛋白定量呈正相关(p<0.05),b组il-23和il-17的表达与b组尿红细胞计数正相关(p<0.05),其余各组与尿红细胞计数无相关性(p>0.05)。(5)大鼠脾脏il-23mrna相对表达量:a组为0.311±0.023、b组为0.936±0.020、c组为0.760±0.021、d组为0.514±0.010、e组0.407±0.020;b组(模型组)脾脏il-23mrna的表达量较a组(正常对照组)上升,且差异具有统计学意义(p<0.05),经治疗后c、d、e组脾脏il-23mrna表达量较b组均有下降(p<0.05);大鼠脾脏il-17mrna相对表达量:a组为0.142±0.005、b组为0.846±0.016、c组为0.596±0.021、d组为0.451±0.021、e组0.311±0.020;b组(模型组)脾脏il-17mrna表达量较a组上升,差异具有统计学意义(p<0.05),经治疗后c、d、e组脾脏il-23mrna表达量较b组(模型组)均有下降(p<0.05);各组大鼠脾脏il-23mrna表达与IL-17mRNA表达正相关性(p<0.05);各组大鼠脾脏IL-23mRNA、IL-17mRNA分别与尿蛋白定量呈正相关(p<0.05),B组大鼠脾脏IL-23mRNA、IL-17mRNA的表达与B组尿红细胞计数正相关(p<0.05),其余各组与尿红细胞计数无相关性(p>0.05)。结论:1、IL-23、IL-17在Ig A肾病的发生和进展中起到一定作用;2、l,25(OH)2D3可能通过下调IL-23/IL-17轴的表达对IgAN起到一定的免疫调节作用。