贾第虫双核所含基因是否相同的证明与核型分析

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蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia)是一类寄生于人体小肠的低等单细胞原生动物。除了医学上的重要性,贾第虫还被认为是目前已知的最原始的真核细胞。它一个重要的特点是具有左右对称的两个细胞核,并且在形态和大小上都很相似。目前,关于贾第虫的双核,尽管有不少研究,但对它的两个核所含基因是否相同(如基因数目、基因种类等),染色体数目是多少等等仍很不清楚。针对此,本文做了以下研究:   基于我们实验室之前对贾第虫基因转换所进行研究的基本情况:在贾第虫基因组中存在13个与基因转换相关的基因的同源物:spo11,rad50,mre11,hop1,rad52,dmc1(dmc1a,dmc1b),pms1,mlh1,msh2,msh6,mnd1,hop2,mlh2,本文通过荧光原位杂交(FISH)实验和RT-PCR实验对这些基因在贾第虫双核中的存在情况、表达情况进行了实验研究。FISH实验的结果显示,这些基因在两个细胞核中都有杂交信号,表明这些基因在两个细胞核中都存在,提示贾第虫的双核中所含基因应该是相同的;RT-PCR实验结果进一步表明,这些基因在贾第虫中都是活跃转录的,提示贾第虫的两个核都应该能发生基因转换。   其次,我们对贾第虫的两个核的核型进行了分析。我们先对贾第虫(WB株)滋养体细胞成功地进行了同步化,富集得到了大量的处于分裂期的细胞,然后对这些细胞进行低渗、固定等处理,制备核型样本进行观察。通过大量的实验成功地获得了贾第虫的核型标本,取得很好的实验观察结果。研究结果表明,大多数细胞的单个细胞核中的染色体数目在8-12之间,并且同一个细胞的两个核内染色体的数目不等。这提示贾第虫的染色体数目不稳定,有一个变化范围;双核之间的核型也存在差异。结合别人在别的株上所显示的不同染色体数,表明贾第虫不同株之间的核型也有差异。这些结果可能对贾第虫的株型分化乃至物种分化、抑或它的原始性或与寄生生活的适应性的相关研究具有重要意义。
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