人源CRHSP-24的晶体学研究和基于结构的功能发现

来源 :中国科学院生物物理研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:longshentailang
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哺乳动物CRHSP-24(calcium-regulated heat-stable protein of24 kDa)是一类功能研究较少的蛋白,在序列上包含了一段约70个氨基酸的高度保守的CSD(coldshock domain)结构域,这个结构域最初是根据原核细胞中的冷激蛋白(CSP,coldshock protein)所命名的,后者是一种mRNA伴侣,能结合核酸并在环境温度骤降时帮助细胞维持正常的转录与翻译活性。我们用单波长反常散射(SAD)解析了人源CRHSP-24的晶体结构,发现它主要是由一个α螺旋和五个反平行的β折叠组成的β筒所构成。通过三级结构比对我们发现41位的Ser到43位的Leu像一个盖子似的调节着CSD与核酸的结合,BIAeore实验证明了41位Ser的模拟磷酸化突变可以完全抑制CRHSP-24与DNA的结合。除此之外,在结构上CRHSP-24的一个不对称单位中有四个分子,它是由两个分子先构成一个二聚体,进一步形成一个四聚体,而这种同源四聚体之间可以在氧化环境下通过分子间二硫键使得CRHSP-24形成高聚,并且不影响其与核酸的结合。最后,结合这些实验结果我们又发现在H2O2刺激的氧化环境下,CRHSP-24与细胞中产生的压力颗粒(stressgranule)共定位,而这种颗粒正是细胞在外界有害环境下所产生的用于保护RNA的物质。因此,哺乳动物CRHSP-24及其同源蛋白很可能在细胞遭受外界压力的情况下对基因的表达调控发挥着至关重要的作用。
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