【摘 要】
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三萜酸类化合物是灵芝三萜类化合物中一类复杂多样的化合物，由于其结构相似，极性相近，利用传统的方法分离制备具有一定的难度。因此，本研究利用高速逆流色谱与高效液相色谱相结合
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三萜酸类化合物是灵芝三萜类化合物中一类复杂多样的化合物，由于其结构相似，极性相近，利用传统的方法分离制备具有一定的难度。因此，本研究利用高速逆流色谱与高效液相色谱相结合的方法，对灵芝子实体中的三萜酸类化合物进行了制备研究。 本研究以D101大孔树脂为填料，用60％乙醇洗脱沪农灵芝1号子实体乙醇提取物，得到灵芝三萜酸(GTA)样品。采用高速逆流色谱对GTA样品进行分离制备，得到灵芝烯酸B的最佳溶剂体系，为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(v/v/v/v，5∶5∶2∶9);其他条件为:流速2.0ml/min;转速900 r/min;检测波长254nm;分离时间400min。样品的上样量为120 mg的条件下，得到灵芝烯酸B(8.1mg)，纯度为86.91％; HS组分(15.3 mg)，HP组分(9.8 mg)。通过对溶剂系统、上样量、流速等条件的摸索与考察，确定了高效液相色谱对HS组分和HP组分中主要化合物的制备条件。HS组分:乙腈-水(v/v，26∶74)，等度洗脱，流速20 ml/min，最大上样量225 mg。得到化合物灵芝酸ε(15.2mg)、灵芝烯酸C(16.3 mg)、灵芝酸C(13.4 mg)，纯度分别为99.3％、98.6％、99.0％。HP组分:乙腈-水(v/v，28∶72)，等度洗脱，流速30 ml/min，最大上样量175mg。得到灵芝酸G和灵芝酸C混合物(22.7mg)。以单因素试验和正交试验进行了高速逆流色谱制备灵芝烯酸B的工艺研究，确定了最佳制备工艺条件:流速:2.0ml/min;转速:900r/min，上样量:500mg。制备得到灵芝烯酸B化合物45.2mg，纯度为85.04％。
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