马齿苋活性物质的提取及其抗氧化性研究

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马齿苋(Portulaca oleracea L.)是马齿苋科马齿苋属一年生肉质草本植物,是我国卫生部划定的101种药食同源的野生植物之一。马齿苋含有丰富的营养成分,同时含有多糖、多酚、黄酮和生物碱等生物活性物质,能清除体内的自由基,有延年益寿的效果。本论文以马齿苋为原料,研究马齿苋的主要营养成分,马齿苋全株、根、茎、叶和花中多糖、多酚和黄酮的含量及其抗氧化性,同时对马齿苋黄酮和生物碱的超声提取工艺采用响应面法进行优化。本论文的主要研究内容和研究结果如下:1、马齿苋主要营养成分。通过对马齿苋水分、灰分、Vc、粗纤维、粗脂肪、粗蛋白、可溶性糖、N、P、Ca、Mg、Cu、Zn、Fe和Mn含量的测定,得出马齿苋是高纤维、高蛋白、低脂肪、绿色安全营养可食的野生蔬菜。2、马齿苋全株、根、茎、叶和花中多糖物质的含量及其抗氧化性。(1)采用超声波法提取马齿苋多糖,经乙醇醇析,无水乙醇、乙醚、丙酮洗涤纯化得多糖物质。采用苯酚-硫酸法测定马齿苋全株、根、茎、叶和花不同器官多糖含量,其多糖含量的大小表现为:茎>全株>叶、花>根,叶和花中多糖含量接近,多糖含量分别为:茎34.87mg/L、全株31.13mg/L、叶24.82mg/L、花24.00mg/L、根22.30mg/L。(2)采用多糖提取物对羟基自由基、超氧阴离子和DPPH自由基的清除能力和还原能力研究马齿苋全株、根、茎、叶和花的抗氧化性。多糖提取物对羟基自由基、超氧阴离子和DPPH自由基清除能力较强的部位分别是叶、叶和根,清除率分别达到91.40%、78.01%和99.36%;多糖提取物还原能力较强的部位是根,达到0.80。3、马齿苋全株、根、茎、叶和花中多酚物质的含量及其抗氧化性。(1)采用超声波法提取马齿苋多酚,经D-101大孔树脂纯化得多酚提取液。采用福林酚法测定马齿苋全株、根、茎、叶和花不同器官多酚含量,其多酚含量的大小表现为:根>叶、全株>花>茎,叶和全株中多酚含量接近,多酚含量分别为:根145.81mg/L、叶93.85mg/L、全株91.83mg/L、花65.00mg/L、茎37.56mg/L。(2)采用多酚提取物对羟基自由基、超氧阴离子和DPPH自由基的清除能力和还原能力研究马齿苋全株、根、茎、叶和花的抗氧化性。多酚提取物对羟基自由基、超氧阴离子和DPPH自由基清除能力较强的部位都是茎,清除率分别达到85.07%、87.81%和98.67%;多酚提取物还原能力较强的部位是根,达到1.90。4、马齿苋黄酮超声提取工艺的优化,马齿苋全株、根、茎、叶和花中黄酮物质的含量及其抗氧化性。(1)采用NaNO2-Al(NO3)3比色法测定马齿苋黄酮含量,以黄酮得率为考察指标,进行单因素实验,考察乙醇体积分数、液料比、提取时间和提取温度对黄酮得率的影响。在单因素实验基础上,进行响应面实验,优化黄酮超声提取工艺。黄酮超声提取的最优工艺为乙醇体积分数80%、液料比30:1(mL/g)、提取时间55.40min、提取温度64.19℃,此条件下马齿苋黄酮理论得率为1.42%,实际得率为1.38%。(2)采用索氏提取法提取马齿苋黄酮,经聚酰胺粉纯化得黄酮提取液。采用NaNO2-Al(NO3)3比色法测定马齿苋全株、根、茎、叶和花不同器官黄酮含量,其黄酮含量的大小表现为:根>叶、全株>花、茎,叶和全株、花和茎中黄酮含量接近,黄酮含量分别为:根202.62mg/L、叶106.19mg/L、全株102.91mg/L、花75.25mg/L、茎69.72mg/L。(3)采用黄酮提取物对羟基自由基、超氧阴离子和DPPH自由基的清除能力和还原能力研究马齿苋全株、根、茎、叶和花的抗氧化性。黄酮提取物对羟基自由基、超氧阴离子和DPPH自由基清除能力较强的部位分别是茎、全株和全株,清除率分别达到85.61%、51.70%和89.38%;黄酮提取物还原能力较强的部位是根,达到1.64。5、马齿苋生物碱超声提取工艺的优化。采用溴甲酚绿比色法测定马齿苋生物碱含量,以生物碱得率为考察指标,进行单因素实验,考察乙醇体积分数、液料比、提取时间和提取温度对生物碱得率的影响。在单因素实验基础上,进行响应面实验,优化生物碱超声提取工艺。生物碱超声提取的最优工艺为乙醇体积分数64.55%、液料比40:1(mL/g)、提取时间40min、提取温度60.25℃,此条件下马齿苋生物碱理论得率为1.58%,实际得率为1.59%。
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