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熊胆粉为熊科动物黑熊经胆囊手术引流胆汁而得的干燥品，居我国四大名贵动物药之首，具有清热解毒、保肝利胆、去翳明目等功效，素有“药中黄金”的美誉，可用于肝胆、眼部及心脑血管疾病的治疗。然而，由于药源稀缺，加之国内外动物保护组织对猎熊割胆的强烈谴责，一度使天然熊胆的生产和发展举步维艰。如今活熊引流取胆技术的成功，实现了熊胆粉较大规模量产，暂时缓解了野生动物资源与临床用药之间的矛盾，但仍然无法满足日益增长的市场需求，这就使得市售熊胆粉品质良莠不齐，甚至出现用廉价胆汁替代熊胆的现象，严重影响了熊胆制剂的临床疗效与用药安全，因此对其质量的全面控制亦显得尤为重要。近年来，虽然熊胆粉的质量标准在逐步完善，但其质量控制指标仍比较单一，仍需建立熊胆粉多成分、多技术同时监测的更全面的质量评价体系。本课题在熊胆粉1996版《部颁标准》的基础上，对其薄层鉴别和含量测定的指标与方法进行了改进与优化，增加了熊胆粉的UPLC-MS指纹图谱分析，并利用多种现代分析技术，对不同动物胆汁中胆汁酸类成分进行了差异比较，为熊胆粉的真伪优劣鉴别提供科学依据。 1.针对熊胆粉现行质量标准的不完善，本研究采用多种分析方法对其进行定性鉴别，以牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)、牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)、牛磺胆酸(TCA)、甘氨熊去氧胆酸(GUDCA)、甘氨鹅去氧胆酸(GCDCA)、熊去氧胆酸(UDCA)、鹅去氧胆酸(CDCA)7个胆汁酸为指标成分，首次建立反相薄层色谱分析方法，并利用HPLC-ELSD对指标性成分牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)和牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)进行含量测定，参照熊胆粉《部颁标准》对其进行水分测定、糖检识、异性有机物检测。熊胆粉的RP-TLC鉴别方法简便，分离度好;HPLC-ELSD和UPLC-MS指纹图谱相似度高;TUDCA含量为27.14-38.18％（平均31.62％），TCDCA含量为22.71-38.26％（平均28.48％），TUDCA/TCDCA的平均配比为1.15;水分为5.43％-7.52％（平均6.98％）;所有熊胆粉样品中均未检测出糖分、植物组织或动物组织等异性有机物。 2.为比较不同动物胆汁中胆汁酸类成分的差异，本研究综合利用RP-TLC、HPLC-ELSD、UPLC-MS三种分析技术和方法，定性和定量地对熊胆、鸡胆、鸭胆、猪胆中胆汁酸类成分进行了差异分析。熊胆中主要含有TUDCA、TCA、TCDCA、UDCA和CDCA，其中TUDCA和UDCA是其特有胆汁酸;鸡胆主要含有TCA、TCDCA、CA、CDCA;鸭胆中主要有TLCA、TCDCA、CDCA;猪胆中主要含有THDCA、GCDCA、TCDCA、HDCA，其中THDCA和HDCA是其特有成分，GCDCA在猪胆中含量很高，其他三个胆汁不含或仅含微量，因此GCDCA也可作为猪胆的特征性胆汁酸。三种分析方法优势互补，其检测结果基本一致，能通过胆汁酸的差异，实现四个动物胆汁的区分，保障熊胆粉质量。 3.本文运用离子阱质谱对16个游离型和结合型胆汁酸的质谱裂解行为进行了初步探究。结果显示，游离型和结合型胆汁酸的ESI-MS/MS裂解方式相似，主要是中性丢失H2O、CO2、CO、甘氨酸、牛磺酸取代基以及发生侧链断裂等。当给予相同碰撞能量时，通过比较二级质谱谱图中碎片离子的类型和丰度，可区分同分异构胆汁酸，实现其快速质谱鉴别。