【摘 要】
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应用反转录-聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chainreaction,RT-PCR)、限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)及 单链构象
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应用反转录-聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chainreaction,RT-PCR)、限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)及 单链构象多态性(single-strand conformation polymorphism,SSCP)分析检测中国水稻条 纹病毒(Rice stripe virus,RSV)RNA4基因间隔区(intergenic region,IR)的分子变异. 该研究对影响SSCP分析的各种实验条件进行了摸索.通过两种方法对中国RSV、SQ、PJ及YL 3个分离物侵染的水稻病叶及带毒灰飞虱的总核酸分别进行了提取,应用RT-PCR技术对提取 的总核酸进行了检测,检测的灵敏度分别为30μg水稻病叶及1/10头带毒虫量的总核酸中的 病毒.对这3个分离物的RNA4 IR的扩增产物进行SSCP分析,结果发现其SSCP图谱为泳动带型不同的电泳条带,说明它们之间存在分子变异.据此建立了一套检测水稻病叶及介体昆虫灰飞虱体内RSV的有效方法.
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