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【目的】探讨connexin26基因启动子区异常甲基化与老年性聋的关系。【方法】D-半乳糖诱导拟老化大鼠模型建立,听性脑干反应(ABR)检测大鼠用药前后听阈,实时定量PCR技术检测线粒体DNA4834bp缺失突变率;实时定量RT-PCR,免疫印迹Western Blot测定用药后Cx26的mRNA和蛋白表达水平;软件分析GJB2基因(编码Cx26蛋白)启动子区;BSP法结合基因测序法检测GJB2基因启动子区甲基化程度;相关分析比较GJB2基因启动子区甲基化程度与Cx26mRNA、蛋白表达水平以及不同剂量组的关系。【结果】线粒体DNA4834bp缺失突变率随D-半乳糖剂量增大而增加,四组之间ABR阈移差异无统计学意义(P>0.05);A、B、C、D四组Cx26mRNA表达水平各组差异无统计学意义(P>0.05);Cx26蛋白表达水平D组较A、B组均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),其余各组间比较差异无统计学意义(P>0.05);Methyl Primer Express软件显示GJB2基因启动子区富含CpG岛;BSP结合基因测序法显示高剂量组内耳组织中GJB2基因启动子区呈高甲基化;GJB2基因甲基化程度与Cx26mRNA、蛋白表达有相关性。【结论】在拟老化大鼠内耳组织中存在GJB2基因启动子区高甲基化与其低表达相关,推测GJB2基因衰老性甲基化可能参与老年性聋的发生发展。【目的】研究缝隙连接蛋白connexin30在D-半乳糖诱导的拟老化大鼠内耳中的表达。【方法】D-半乳糖诱导拟老化大鼠模型建立,听性脑干反应(ABR)检测大鼠用药前后听阈,实时定量PCR技术检测线粒体DNA4834bp缺失突变率;实时定量RT-PCR测定各组用药后Cx30 mRNA的表达水平;免疫印迹Western Blot测定各组用药后Cx30蛋白的表达水平。【结果】线粒体DNA4834bp缺失突变率随D-半乳糖剂量增大而增加,四组之间ABR阈移差异无统计学意义(P>0.05);Cx30mRNA表达水平各组差异无统计学意义(P>0.05);Cx30蛋白表达水平B组较A组、D组显著增高,差异有统计学意义(P<0.05),其余各组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】Cx30蛋白表达水平在拟老化大鼠内耳组织中存在不同程度的代偿性升高,推测connexin30可能参与老年性聋的发生发展。