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背景我国是世界上食管癌高发地区之一,食管癌是导致死亡的第五大癌症,每年平均病死约15万人。中国食管癌患者的主要类型是食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)。虽然诊断技术和疗法不断进步,但五年总体生存率仍不高,预后差[1]。因此,ESCC生物标志物或药物靶标的研究十分重要,尤其是对于ESCC高发地区的中国而言。胞内氯离子通道(chloride intracellular channels,CLICs)蛋白家族成员,具有广泛的功能,如电介质转运、离子稳态、细胞p H和细胞体积调节等,参与调节肿瘤细胞的增殖、迁移和对非肿瘤组织的侵袭,可能是潜在的肿瘤治疗靶标。尤其是CLIC4,不仅在特定的肿瘤类型或它们相应的基质中高表达,改变其定位和功能,既可以作为活性离子通道,亦可在某些细胞周期进程中参与信号转导,可以靶向肿瘤细胞而不影响正常细胞的生理功能,可能是肿瘤治疗的潜在药物靶点。目的研究ESCC患者癌组织中CLIC4的表达情况;研究CLIC4是否参与调控ESCC细胞的增殖、迁移或侵袭;本研究旨在进一步揭示CLIC4在ESCC中的作用及其调控机制,为治疗ESCC药物的研发提供新的思路。方法免疫组织化学和Western blot分析正常组织与癌组织中CLIC4的表达情况;构建慢病毒载体介导的CLIC4稳定低表达细胞株;克隆形成实验和CCK-8实验检测CLIC4敲低对ESCC细胞增殖的影响;Western blot检测CLIC4敲低后ESCC细胞中迁移相关蛋白如E-cadherin和N-cadherin等的变化情况。Western blot检测在ESCC病人组织样本中与CLIC4相关的蛋白,如雌激素反应性指蛋白(tripartite motif-containing 25,TRIM25)、微小染色体维持蛋白2(mini-chromosome maintenance protein2,MCM2)等的蛋白水平的变化情况。结果CLIC4在ESCC患者组织和ESCC细胞系中均高表达,与组织的转录组测序结果一致;成功构建稳定低表达CLIC4的ESCC细胞株;CLIC4不影响ESCC细胞的增殖,而是通过促进ESCC细胞的迁移发挥促癌作用;Western blot结果表明CLIC4敲低后,上调TRIM25的蛋白表达水平,下调MCM2和N-myc下游调节基因1(N-myc downstream related gene 1,NDRG1)的蛋白水平。结论CLIC4通过促进ESCC细胞的迁移发挥促癌作用,但不影响ESCC细胞的增殖,其机制可能为通过下调TRIM25的蛋白表达水平、上调NDRG1和MCM2的蛋白表达水平实现的。