延伸蛋白2基因在仿刺参再生过程中的表达分析

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延伸体(elongator)是由ELP1-3核心亚体复合物和ELP4-6较小亚体复合物构成的一个多蛋白复合物。在酵母和人类中,延伸体蛋白复合物具有高度的保守性。它参与RNA聚合酶II介导的转录延伸、tRNA修饰、细胞分裂、细胞骨架构建等许多细胞调控过程,在其调控过程中起到重要作用。延伸蛋白2(ELP2)是延伸体蛋白复合物中的一员,因此在生物体中也参与着重要的生理过程,对于生物体的生长和发育起着不容忽视的重要作用。本文首次采用基因克隆(RACE)技术获得了仿刺参延伸蛋白2(Ajelp2)基因的全长cDNA序列,该全长序列包含3058bp碱基对,包括54bp5’端非编码区,526bp3’端非编码区和一个2478bp的开放阅读框编码825个氨基酸。该序列的分子量是91.6kDa和等电点为5.84。通过与其他物种的序列进行比对发现,Ajelp2基因序列具有较高的保守性。通过原位杂交技术分析了Ajelp2基因在仿刺参不同组织中的表达部位,该实验结果显示Ajelp2基因在仿刺参的各组织中均有表达,尤其是在体壁和肠中的表达较强。为了检测Ajelp2基因在仿刺参的不同组织的不同再生阶段的表达量,我们使用了Real-TimePCR技术进行了检测。实验结果显示Ajelp2基因在肠和呼吸树中的表达趋势相似,都是随着组织的再生Ajelp2基因的表达量也逐渐上调,并且在15d时表达量最高,随着组织恢复到正常大小,该基因的表达量也逐渐下调,最后恢复到正常水平。在体壁组织中,在再生的早期阶段Ajelp2基因表达量出现短暂且明显的上调趋势,随后表达量下调,在50min又出现明显的上调。在体壁再生的后期阶段,随着组织的再生,Ajelp2基因表达量逐渐上调,最后恢复到正常水平。上述实验结果及分析表明Ajelp2基因在仿刺参再生过程中发挥了重要的作用,对Ajelp2基因在仿刺参再生过程中的调控作用的研究为今后研究仿刺参的再生分子机制及调控通路提供了参考资料,具有一定的理论意义。同时,也为养殖者进一步了解仿刺参苗种的生产、养殖、防治及提高苗种成活率等方面具有潜在的应用价值。
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