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目的:卵巢癌为妇科恶性肿瘤的首要死亡原因之一,5年生存率仍徘徊在30%左右。近几年,细胞因子基因治疗已成为一种新型的肿瘤治疗方法,并越来越受到人们的重视。CD40是存在于免疫细胞及多种肿瘤细胞上的肿瘤坏死因子受体超家族成员,已有研究证明用CD40配体可直接诱导CD40阳性的人结肠癌、乳腺癌和肺癌细胞的凋亡。本研究旨在探讨人的可溶性CD40配体(soluble CD40 ligand, sCD40L)对人上皮性卵巢癌细胞株SKOV3及其对顺铂耐药的卵巢癌细胞株SKOV3/DDP增殖的影响及可能作用机制,为sCD40L应用于卵巢癌和对DDP耐药的卵巢癌的治疗之可行性提供理论依据。方法:1反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测SKOV3及SKOV3/DDP细胞中CD40基因的表达情况。2 Cell Titer 96 AQueous非放射性细胞增殖检测法(MTS)检测不同浓度sCD40L在不同时间对SKOV3、SKOV3/DDP细胞增殖的影响,同时检测不同浓度的顺铂在相同时间内对两种细胞增殖的影响。3 MTS法检测sCD40L联合顺铂对SKOV3、SKOV3/DDP细胞抑制增殖的影响。4流式细胞术检测sCD40L及sCD40L联合顺铂处理SKOV3细胞前后细胞周期的改变。5 RT-PCR的方法检测sCD40L及sCD40L联合顺铂处理SKOV3细胞前后survivin,caspase-3及caspase-9基因的表达情况。6 RT-PCR的方法检测sCD40L及sCD40L联合顺铂处理SKOV3/ DDP细胞前后MDR1,LRP, GST-π及survivin基因的表达情况。结果:1 SKOV3及SKOV3/DDP细胞中均有CD40的表达,SKOV3的表达水平为0.281±0.007,SKOV3/DDP的表达水平为0.427±0.012。2不同浓度的sCD40L对两种细胞的抑制作用随浓度的增加而增强,呈明显的剂量依赖性,不同浓度间比较差异具有显著性(P<0.05);同一浓度作用于两种细胞,抑制作用的差异无显著性(P>0.05)。sCD40L对于SKOV3细胞48h的IC50为3.47μg/ml,对SKOV3/DDP细胞的IC50为3.22μg/ml。3顺铂对SKOV3/DDP细胞的IC50为25.12μg/ml,是对SKOV3细胞的(IC50为5.52μg/ml)4.55倍,即SKOV3/DDP细胞耐药倍数为4.55。4 sCD40L联合顺铂作用于SKOV3细胞,使顺铂IC50由单用时的5.52μg/ ml,分别下降到2.61μg/ml和1.46μg/ml。对sCD40L1μg/ml联合顺铂作用于SKOV3/DDP细胞后,使顺铂的IC50由单一用药时的25.12μg/ml下降为9.25μg/ml,逆转倍数2.71;sCD40L 2μg/ml联合顺铂使顺铂的IC50下降为4.83μg/ml,逆转倍数5.20。5 sCD40L和顺铂作用SKOV3/DDP细胞48h后,sCD40L组和顺铂联合sCD40L组出现G0/G1期比例上升,S期比例下降,药物浓度越高,该作用越明显,sCD40L与顺铂联合作用比单独用sCD40L时更明显(P<0.05)。6 SKOV3细胞经sCD40L和顺铂作用48h后,各组的survivin mRNA的表达水平逐渐降低,caspase-3 mRNA及caspase-9 mRNA的表达水平逐渐增高,与阴性对照组相比较,差异有统计学意义(P<0.05)。7 SKOV3/DDP细胞经sCD40L和顺铂作用48h后,各组的MDR1 mRNA、LRP mRNA、GST-πmRNA及survivin mRNA的表达水平逐渐降低,与阴性对照组相比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1 SKOV3、SKOV3/DDP细胞中均有CD40的表达。2 sCD40L可抑制SKOV3细胞的增殖,sCD40L和顺铂联合应用可加强顺铂对细胞的抑制作用。sCD40L可能使细胞阻滞于G0/G1期而使细胞的生长受到抑制,sCD40L可能通过下调survivin基因,上调caspase-3,caspase-9基因而诱导SKOV3细胞凋亡。3 sCD40L可抑制SKOV3/DDP细胞的增殖,并在一定程度上可逆转SKOV3/DDP细胞的耐药。sCD40L可能通过下调MDR1、LRP、GST-π、survivin基因而逆转SKOV3/DDP细胞的多药耐药。