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目的:研究低强度氦氖激光及联合黄芪注射液对小鼠骨髓造血细胞的影响,为临床扩增造血干细胞提供新的方法和实验依据.
方法:昆明小白鼠30只,随机分为6组:正常对照组(A组注射生理盐水)、黄芪注射液组(B组0.1ml·d-1)、2.75J/cm2激光照射组(C组)、4.20 J/cm2激光照射组(D组)、2.75J/cm2激光照射+黄芪注射液组(E组)、4.20J/cm2激光照射+黄芪注射液组(F组)。A组每天腹腔注射生理盐水0.1ml,连续注射7天;B、E、F组每天腹腔注射黄芪注射液0.1ml,连续注射7天;C、D、E、F组每天激光照射双侧股骨头各5分钟,连续照射10天。24小时后将各组小鼠脱颈椎处死,分离出双侧股骨及胫骨骨髓细胞,培养7天后,计数各组CFU-GM的数量变化,并用流式细胞术检测各组的细胞周期变化及造血干细胞Sea-1阳性率的表达情况。
结果:
(1)CFU-GM的数量:B、C、D、E、F组均比A组高,且F组最显著;E组与F组均高于B、C、D组。
(2)S期、G2/M期及S+G2/M期细胞比例:B、C、D、E、F组均高于A组,且F组最显著;E组与F组均高于B、C、D组。
(3)造血干细胞Sea-1阳性率表达:B、C、D、E、F组均高于A组,且F组最显著;E组与F组均高于B、C、D组。
结论:
(1)连续低强度氦氖激光照射对小鼠骨髓造血细胞有增殖作用,能够促进造血祖细胞集落CFU-GM数量的增加,刺激造血细胞从静止期进入到增殖期,还可以增加造血干细胞Sca-1阳性率的表达。同时,激光剂量的不同对其影响也不同,氦氖激光照射剂量4.20 J/cm2要优于2.75J/cm2照射效果。
(2)黄芪注射液对小鼠骨髓造血细胞具有一定的刺激增殖作用。
(3)激光照射+黄芪注射液组(E、F组)中的CFU-GM数量、造血干细胞Sea-1阳性率的表达以及细胞周期中S期、G2/M期和S+,G2/M期的细胞比例均明显高于其它各组,说明低强度氦氖激光与黄芪注射液联合对小鼠骨髓造血细胞具有协同刺激作用,其中剂量为4.20 J/cm2的氦氖激光照射时效果最佳。