论文部分内容阅读
DNA是生命体的重要组成物质，与生物的生长、发育等正常生命活动以及癌变、突变等异常生命活动息息相关。而DNA拓扑异构酶是近年来研究最多的与染色质结构有关的核蛋白。它通过改变DNA的拓扑结构，在DNA复制、转录过程中发挥着重要作用。许多抗肿瘤药物都是作为DNA拓扑异构酶抑制剂起作用，而这种抑制作用又往往与小分子键合DNA的能力有关。本论文设计合成了一系列新型的钌多吡啶配合物，研究了它们与双螺旋DNA的相互作用以及对DNA拓扑异构酶的抑制能力，并以酿酒酵母系统为模型探索了钌多吡啶配合物对人的DNA拓扑异构酶Ⅱ的靶向性。全文共分为四章。
第一章，绪论，主要介绍了关于DNA、DNA拓扑异构酶抑制剂的基本概念，介绍了配合物与DNA作用以及作为拓扑酶抑制剂的研究方法和进展。
第二章，设计合成了八个含有噻吩基团的手性钌配合物。对这些配合物以质谱，元素分析、核磁共振和电化学等实验手段进行了表征，归属和分析。用光谱、热力学、粘度、圆二色谱等方法研究了配合物与DNA的作用，发现八个配合物都以插入的方式与DNA结合，但无明显的异构体选择性。
第三章，研究了八个手性钌(Ⅱ)多吡啶配合物对DNA拓扑异构酶的抑制作用，从配合物与拓扑异构酶的抑制研究结果来看，含有卤原子的配合物在浓度相对较低的情况下，就能对TopoⅠ和TopoⅡ产生抑制作用，在高浓度的情况下能诱导DNA缩合。另两对手性配合物同样能对TopoⅠ和TopoⅡ产生抑制作用，但IC50值较高。从抑制的机理来看，这八个配合物都是TopoⅠ/Ⅱ的双重毒剂。
第四章，将人的DNA拓扑异构酶Ⅱ基因转入酵母细胞，使其在酵母细胞中得到表达。利用流式细胞仪、荧光显微镜以及CFU记数等方法研究了本文涉及到的配合物对人DNA拓扑异构酶Ⅱ的靶向性抑制。实验结果表明，这一系列钌配合物在酿酒酵母体系中并没有针对人的DNA拓扑异构酶Ⅱ起作用。含有卤原子的钌配合物在高浓度时对酵母细胞的存活影响非常明显，这很可能是配合物诱导DNA缩合的能力所致。