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抗菌肽是一类具有抗菌活性的小分子多肽，是生物体免疫系统的重要组分。家蝇（Musca domestica）生活在细菌横生的恶劣环境中，表现出很强的适应能力，这是因为其自身具有较为完善的免疫系统，形成了抵御外来有害微生物入侵的防御机制。
本论文以家蝇为研究材料，研究内容主要分为3个部分：
第1部分：通过RT-PCR及RACE技术从家蝇幼虫体内克隆获得2 种不同的抗菌肽基因的cDNA序列，根据同源分析，将其分别命名为：家蝇双翅肽（Musca domesticaDiptericin，MdDpt）和家蝇攻击素-2（Musca domestica Attacin-2，MdAtt-2），并对其蛋白质序列进行了分析；
第2 部分：以家蝇β-actin基因作为内参分子，利用半定量RT-PCR对经大肠杆菌（Escherichia coli）刺激后MdDpt和MdAtt-2基因的mRNA表达水平进行相对定量研究；
第3 部分：构建了家蝇MdDpt和MdAtt-2基因的原核表达载体，并在大肠杆菌DE3体内进行诱导表达，以纯化后的DsbA-MdDpt融合蛋白免疫新西兰大白兔制备了抗血清。
研究结果：
（1）得到一条全长410bp的家蝇MdDpt基因cDNA序列，包含一个300bp的完整开放阅读框（ORF），根据ORF推导的MdDpt 多肽由99个氨基酸残基组成，SignalP3.0 程序预测n端包括20个氨基酸残基的信号肽，MdDpt成熟肽由79个氨基酸残基组成，理论分子量为8.79kD，理论等电点为8.27。同源性分析表明，它与厩蝇（Stomoxyscalcitrans）的Diptericin A mRNA相似性最高（identity=74％）。
（2）MdAtt-2基因cDNA 序列其全长809bp，编码区长726bp，根据ORF推导的MdAtt-2多肽由241个氨基酸残基组成，SignalP 3.0程序预测N 端包括22个氨基酸残基的信号肽，MdAtt-2成熟肽由219个氨基酸残基组成，理论分子量为23.63kD，理论等电点为9.77。同源性分析表明，氨基酸与棕尾别麻蝇（Sarcophaga peregrina）的Sarcotoxin IIA 具有最高相似性（identity=45％）。
（3）半定量RT-PCR分析：数据分析表明在未经诱导的家蝇幼虫体内2个基因的表达量均很低，经过大肠杆菌（E. Coli）刺激后2个基因表达量迅速上调，在12h后达到高峰，随后逐渐恢复，72h后趋于恢复向正常水平，通过t 检验，2个基因的表达量在6~72h后均高于未刺激的对照组，且具有显著性差异（P<0.01）。
（4）利用高效原核表达载体pET-DsbA，成功实现了MdDpt和MdAtt-2基因在大肠杆菌DE3中的融合表达，IPTG终浓度为0.8mmol/L。SDS-PAGE蛋白电泳显示，获得的融合蛋白DsbA-MdDpt分子量约为33kD，融合蛋白DsbA-MdAtt-2分子量约为48kD，目的条带大小均与预期分子量大小一致。利用His亲和层析纯化两种融合蛋白，并用DsbA-MdDpt 融合蛋白免疫新西兰大白兔制备抗MdDpt 抗血清，Western Blot结果表明此抗血清具有很好的特异性。