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目的：肾小管上皮细胞凋亡导致的细胞萎缩、坏死在醛固酮致肾损伤中起着越来越重要的作用。本研究期望探讨其内在机制及氧化应激和内质网应激在醛固酮致肾损伤中的作用。方法：1.体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2),细胞同步化后给予不同浓度醛固酮(Aldosterone)刺激,应用荧光显微镜定性观察活性氧(ROS)表达情况；免疫荧光酶标仪定量检测活性氧(ROS)表达；应用激光共聚焦,形态学观察肾小管上皮细胞凋亡；Annexin V/propidium iodide双染后,流式细胞仪定量检测细胞凋亡情况；Real-time PCR、Western blot法检测糖调节蛋白(glucose-regulated protein78, GRP78)和CHOP表达水平。2.体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2),细胞生长融合至50%时，向6孔板中分别转入500nM CHOP特异性干扰RNA (CHOP siRNA)和空载对照干扰RNA (Vehicle siRNA),处理24小时后根据不同分组,分别向6孔板中加入醛固酮(100nM)或抗氧化剂N-乙酰-L-半胱氨酸(5mM)(N-acetyl-L-cysteine, NAC), Annexin V/propidium iodide双染后,流式细胞仪定量检测细胞凋亡情况。3.体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2),细胞同步化后给予醛固酮(100nM)刺激干预,根据不同分组加入NAC (5mM)和空载,Western blot法检测GRP78和CHOP表达水平。结果：1.不同浓度的醛固酮能够剂量依赖性、浓度依赖性的诱导大量ROS的产生；流式细胞术显示不同剂量的醛固酮能够显著增加肾小管上皮细胞凋亡；Western blot法显示醛固酮能够剂量依赖性、时间依赖性的增加GRP78表达水平；Real-time PCR显示醛固酮能够剂量依赖性增加CHOP基因表达(P<0.05)。2.醛固酮(100nM)能够显著增加肾小管上皮细胞凋亡,CHOP siRNA和抗氧化剂NAC能够明显缓减醛固酮诱导的肾小管上皮细胞凋亡,差异有统计学意义(P<0.05)。3.醛固酮(100nM)能够显著增加肾小管上皮细胞中GRP78和CHOP蛋白表达水平,而抗氧化剂NAC干预后能够明显缓减GRP78和CHOP蛋白表达(P<0.05)。结论：醛固酮能够分别诱导肾小管上皮细胞发生氧化应激和内质网应激,ROS介导的,CHOP转录因子依赖的内质网应激通路在醛固酮致肾小管上皮细胞凋亡中起着重要作用。目的：观察醛固酮致肾损伤模型中是否存在内质网应激通路的激活及抗氧化剂NAC对醛固酮所致肾损伤的保护作用及可能相关机制。方法：30只雄性SD大鼠于实验前两周行右肾切除手术。两周后大鼠随机分为以下4组：对照组(0.5%乙醇,皮下微泵埋置,n=6);1%NaCl组(1%NaCl饮水,0.5%乙醇,皮下微泵埋置,n=8)；醛固酮处理组(1%NaCl饮水,醛固酮,0.75μg/h,皮下微泵埋置,n=8); NAC干预组(1%NaCl饮水,醛固酮,0.75μg/h,皮下微泵埋置,NAC100mg/kg/day灌胃,n=8)。每周测量大鼠尾动脉血压；每周使用代谢笼收集24小时尿液。建模4周后腹腔麻醉大鼠,腹主动脉采血检测肌酐水平；肾组织固定、切片后行PAS染色观察肾脏病理变化；(TdT)-Mediated dUTP Nick-End Labeling (TUNEL)法检测肾小管上皮细胞凋亡；比色法测定大鼠血清中脂质过氧化标志物丙二醛MDA以及超氧化物歧化酶SOD的含量；酶联免疫吸附法测定血清中8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)表达水平；Western blot法检测肾组织中糖调节蛋白(glucose-regulated protein78, GRP78)和CHOP表达水平。结果：与对照组及1%NaCl组大鼠比较,醛固酮处理组大鼠4周时尾动脉血压、尿蛋白明显增高,病理显示肾小球系膜细胞增生,细胞外基质明显增多,系膜区明显扩张超过毛细血管袢,TUNEL显示肾小管上皮细胞凋亡明显增多；而抗氧化剂NAC能够显著降低大鼠血压和蛋白尿,减少小管细胞凋亡,改善肾功能。同样相似的结果显示：醛固酮处理组大鼠与对照组及1%NaCl组大鼠比较,氧化应激相关指标MDA、8-OHdG和肾组织中内质网应激标志蛋白CHOP、GRP78明显增高,SOD水平表达下降,而抗氧化剂NAC能够显著上调SOD表达,降低内质网应激相关蛋白和MDA、8-OHdG表达水平。结论：醛固酮致肾损伤模型中存在内质网应激状态,抗氧化剂可能通过抑制内质网应激通路缓减肾小管上皮细胞凋亡,改善肾功能。