【摘 要】
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目的初步探讨肾型谷氨酰胺酶(Kidney-type glutaminase,GLS1)对肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)生物学功能及血管生成拟态(Vasculogenic mimicry,VM)的影响。方法通
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目的初步探讨肾型谷氨酰胺酶(Kidney-type glutaminase,GLS1)对肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)生物学功能及血管生成拟态(Vasculogenic mimicry,VM)的影响。方法通过细胞增殖实验、划痕实验及侵袭实验探讨GLS1对肝癌SMMC-7721细胞系生物学功能的影响,应用三维细胞培养技术观察肝癌SMMC-7721细胞系经过GLS1抑制剂作用后的VM结构变化,运用Western blot技术检测抑制GLS1对肝癌SMMC-7721细胞系的VM相关蛋白血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)和血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白表达的影响。结果CCK-8检测结果显示,抑制GLS1的活性能够抑制肝癌细胞的增值,并且呈时间和浓度依赖性;划痕实验结果显示,划痕后24h,实验组的细胞划痕愈合速度低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Transwell侵袭实验结果显示,对照组细胞株在培养24h后穿膜细胞数高于实验组,差异有统计学意义(P<0.05);三维细胞培养结果显示,对照组中可见SMMC-7721细胞系形成血管生成拟态,实验组见血管生成拟态结构被破坏,对照组形成的血管生成拟态的小管数量和节点数明显多于实验组,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.05);Western blot结果显示,对照组VE-cadherin和VEGF蛋白灰度与实验组比较,VE-cadherin和VEGF蛋白的表达量未见明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。结论GLS1促进肝癌细胞增殖、迁移和侵袭能力,抑制GLS1的活性能够破坏血管生成拟态结构,此现象提示GLS1可能与肝癌血管生成有关,但结果仍需要进一步探究。
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