银杏叶提取物对发育期戊四氮点燃癫痫大鼠学习记忆与海马神经干细胞增殖、分化的影响

来源 :徐州医学院 徐州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:areyoureadygolaopo
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目的:探讨EGb对癫痫点燃模型幼鼠学习记忆等认知功能的影响及可能机制,为临床应用EGb治疗癫痫儿童认知功能障碍提供实验依据。   方法:选择生后21日龄SD大鼠,随机分为正常对照组(NS组)、模型对照组(PT27d组、PT214d组)以及银杏叶提取物治疗组(EGb7d组、EGb14d组),应用戊四氮(pentetrazole,PTZ)制作慢性点燃癫痫模型;使用Y-型迷宫测试模型建立前后及EGb治疗前后大鼠行为学变化;通过免疫组化法观察大鼠点燃成功后EGb7d或EGb14d治疗对海马区细胞增殖情况的影响;同时通过标记5-溴脱氧尿核苷(BrdU)、NeuN、GFAP观察神经干细胞(NSCs)分化情况。   结果:   1、慢性点燃模型的建立及癫痫行为学观察:NS组无癫痫发作,其余4组大鼠在点燃后均达到连续5次Ⅱ级以上发作。   2、Y-型电迷宫测试结果:EGb治疗前,PTZ各点燃大鼠与NS组相比,达到学会标准所需的电击次数明显增多(P<0.01);EGb(300mg/kg.d)治疗7d和14d后的两组大鼠达到学会标准的电击次数均明显少于相应的PTZ点燃对照组(P<0.01),而EGb7d和EGb14d治疗组,达到学会标准所需的电击次数未见明显差异(P>0.05)。   3、NSCs增殖情况:选择Nestin阳性细胞表达作为判断NSCs增殖的指标,结果我们发现PTZ点燃组Nestin阳性细胞表达量较NS组明显增多(P<0.01);EGb7d组和EGb14d组Nestin阳性细胞表达量较相对应PTZ点燃对照组的表达又进一步有所增多(P<0.05),但是随着7d至14dEGb疗程的增加,EGb14d组Nestin阳性细胞数量要低于EGb7d组(P<0.05),所有增殖的Nestin阳性细胞均主要分布于海马CA1、CA3区颗粒细胞层和颗粒细胞下层。   4、NSCs分化情况:EGb治疗后BrdU/NeuN细胞数明显多于EGb治疗前(E7和E14组),而且EGb14d组的BrdU/NeuN阳性细胞表达百分比又高于EGb7d组,差异均有统计学意义(P<0.05)。同时在EGb治疗组有4%-5%共表达GFAP,阴性对照组无免疫反应产物。   结论:反复痫性发作可以导致幼鼠学习记忆能力下降,EGb可以明显改善点燃幼鼠的学习记忆功能并可能与EGb诱导神经干细胞增殖、分化有关。
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