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家蚕(Bombyx mori)是一种重要的鳞翅目模式昆虫,是研究变态发育的理想材料。脂肪体是体内的一种重要组织器官,它既是代谢中心,又是激素作用的靶组织,在家蚕生长发育和变态过程中发挥着极其重要的作用。我们进行了家蚕脂肪体在变态发育过程中的蛋白质组学研究,以期找到与变态发育密切相关的蛋白。另外昆虫翅的发育是一个典型的变态过程,我们对在翅原基中表达的Hemolin蛋白和Yippee蛋白进行了相互作用研究,为今后研究两者在发育过程的作用提供依据。本研究得到如下一些结果:1.从家蚕五龄幼虫期和蛹期不同发育阶段提取脂肪体总蛋白,利用双向电泳技术进行分离和鉴定,找出不同时期的27个差异蛋白点;对这些蛋白进行质谱分析及数据库检索,检索到相匹配的候选蛋白质,这些蛋白与物质和能量代谢、细胞骨架、蛋白质代谢与合成、生长发育、信号转导等生理活动紧密相关,在家蚕生长发育与变态发育的过程中可能发挥着重要的功能和作用。2.从27个差异蛋白点中选取了9个蛋白相对应的基因进行荧光定量分析,其中有70K热休克蛋白、脯氨酰羟化酶、延伸因子、谷胱甘肽硫解转移酶、琥珀酰辅酶A、胰凝乳蛋白酶抑制剂、胞质甲酰四氢叶酸脱氢酶和β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶等等,并对它们在变态发育中的可能作用进行了分析。3.通过制备抗体来研究Hemolin蛋白与Yippee蛋白之间的相互作用。我们用新西兰大白兔制备了家蚕Yippee蛋白的多克隆抗血清,Western Blotting结果显示出我们制备的家蚕Yippee蛋白兔多克隆抗血清具有较好的特异性。4.利用本实验室之前制备的家蚕Hemolin鼠多克隆抗血清和Yippee蛋白兔多克隆抗血清对Hemolin和Yippee蛋白进行了免疫共沉淀和杂交实验,结果证明了Hemolin和Yippee蛋白在家蚕翅原基中有相互作用。通过上述研究我们找到了一些与变态发育有关的重要蛋白,对变态发育的研究有着一定的参考价值。我们提出了一个关于Hemolin与Yippee蛋白的相互作用的一个假设,对揭示翅原基的发育提供了一个新的线索。