【摘 要】
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CD20分子是B细胞表面特有的标志物,而且CD20分子表达于绝大多数B淋巴瘤细胞表面,但是在干细胞、祖B细胞、正常的浆细胞或者其它的正常组织细胞中均不表达CD20分子,所以CD20分
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CD20分子是B细胞表面特有的标志物,而且CD20分子表达于绝大多数B淋巴瘤细胞表面,但是在干细胞、祖B细胞、正常的浆细胞或者其它的正常组织细胞中均不表达CD20分子,所以CD20分子是治疗B细胞淋巴瘤的一个重要药物靶点。美罗华是第一个上市的抗CD20单克隆抗体,也是第一个用于B淋巴瘤治疗的抗体。虽然美罗华在治疗各种恶性B淋巴瘤方面取得了巨大的成功,但是CD20的生物学功能仍然不是很清楚。最近有文献报道CD20分子有可能与B细胞受体(BCR)存在相互作用,为此本论文通过构建BCR各组分胞外区与荧光蛋白组成的融合蛋白进行GST沉降实验以及FRET实验确定了CD20分子与BCR发生相互作用的是BCR的胞外区,其组分包括:Ig-β(26-135AA)和sIgM的Cμ2(266-382AA)。同时,本论文利用BCR与CD20分子之间的相互作用构建了三个重链抗体样分子真核表达载体: CD20(140-186AA)-CH1Fc、Ig-α(33-118AA)-CH1Fc和Ig-β(26-135AA)-CH1Fc。其中Ig-α(33-118AA)-CH1Fc通过转染HEK293细胞,表达纯化后已经得到蛋白,另外两种重链抗体样分子的表达纯化工作仍在进行之中。期望三个重链抗体样分子通过胞外区蛋白定位于B淋巴瘤细胞表面,然后利用Fc段诱导的CDC和ADCC效应,以及重链抗体样分子对于BCR或CD20分子的封闭所可能引起的细胞凋亡对于B淋巴瘤细胞进行杀伤。
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