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目的优化桑叶降糖成分提取、澄清纯化和成型工艺,确定最佳制备工艺,节约成本,保证该工艺在实际操作中稳定可行；建立桑元止渴胶囊质量标准,通过对桑叶生物碱中DNJ含量测定,桑叶总多糖和总黄酮含量测定,用于控制桑元止渴胶囊质量,为桑元止渴胶囊申请新药奠定基础。方法1.桑叶降糖成分复合提取工艺研究通过单因素试验考察提取时间、提取温度、乙醇体积分数、料液比、提取次数及溶剂pH对桑叶总生物碱提取率的影响,然后以桑叶生物碱提取率为指标,选取影响显著的因素和水平,通过Box-Behnken向应面分析法,利用Design Expert 8.0.5分析软件对试验数据进行分析,确定最佳提取工艺。然后将桑叶粉残渣加水,进行提取时间,提取温度、料液比和提取次数的单因素实验,选择显著性因素,设计水平,以桑叶总多糖和总黄酮提取率为指标进行响应面法分析优化,确定最佳提取工艺。2.ZTC1+1Ⅱ天然澄清剂用于桑叶降糖成分提取液的澄清工艺以桑叶生物碱、黄酮和多糖保留率,固形物去除率为指标,进行单因素试验,分别考察澄清剂加入顺序、澄清剂加入量、生药浓度、作用温度、搅拌时间、搅拌速率及水浴保温时间对桑叶提取液除杂效果的影响。在单因素试验的基础上,应用响应面分析法优选澄清工艺条件。3.桑元止渴胶囊成型工艺研究首先考虑口服剂量,以此来确定制粒方式,选择合适的干燥工艺；然后以不影响桑叶多糖含量测定为原则,筛选药用辅料；接着通过胶囊质量检查、制得颗粒吸湿性和流动性研究的结果,确定辅料用量；最后以制粒后的颗粒得率为因变量,辅料比例,润湿剂乙醇浓度和用量为自变量,采用正交试验设计优化制粒工艺条件,确定桑元止渴胶囊制粒工艺中的最佳辅料比例,乙醇浓度和用量。4.桑元止渴胶囊质量标准研究采用薄层色谱法(TLC)以桑叶对照药材和芦丁对照品为对照,对桑元止渴胶囊原料桑叶进行定性鉴别；采用高效液相二级质谱法(HPLC-MS／MS)对桑元止渴胶囊中的主要有效成分脱氧野尻霉素进行定量测定,制定制剂中脱氧野尻霉素的含量限度范围。脱氧野尻霉素定量测定的色谱条件为,色谱柱：Agi lentHC-C18柱(4.6mm×50mm,1.8μm),以水为流动相A,乙腈为流动相B,A：B=10：90(V：V),流速为04mL／min,柱温为常温；质谱条件为,电喷雾离子源ESI,毛细管电压4000V,正离子模式,干燥气温度350℃,干燥气流量10L/min,雾化气压力20psi,扫描方式为多重反应检测(MRM),驻留时间200,碎裂电压75,碰撞能量18eV,用于定量分析的离子对为164.1/69.0,母离子分辨率为宽泛,子离子分辨率为精确,通过方法学验证,建立稳定可行的含量测定方法。通过紫外-可见光分光光度计,分别采用苯酚-硫酸法和亚硝酸钠-硝酸铝法对桑元止渴胶囊中的桑叶总多糖和总黄酮进行定量分析,测定制剂中桑叶总多糖和总黄酮的含量限度范围,建立稳定可行的质量标准。结果1.采用Box-Behnken响应面法优选出了桑叶降糖成分最佳提取工艺：桑叶生物碱提取工艺是加热回流提取,以乙醇和水为混合提取溶剂,提取温度80℃,提取时间120min,乙醇浓度65%,pH为5,料液比1：12,提取1次,桑叶生物碱提取率为0.356%；将桑叶生物碱提取后的桑叶残渣加水,热水浸提桑叶总多糖和总黄酮,最佳提取工艺是,提取温度82℃,提取时间150min,料液比1：10,提取2次,桑叶总多糖和总黄酮提取率分别为8.161%和2.589%。实际值与预测值偏离率分别为2.068%,2.346%和1.293%。2.在ZTC1+1 Ⅱ天然澄清剂2组分加入顺序先B组分后A组分,澄清剂B组分加入量为10%药液体积,A组分为5%,药液浓度为0.17g/mL,作用温度为76℃,搅拌速率为120r/min,搅拌10min,80℃水浴保温30min,静置12h的工艺条件下,桑叶生物碱保留率为92.5%,桑叶黄酮保留率为90.2%,桑叶多糖保留率为91.1%,固形物去除率为26.5%。3.采用真空干燥,干浸膏制粒法,将干浸膏与混合辅料(微晶纤维素：二水硫酸钙=2：1)以10：1.5,润湿剂乙醇浓度为95%,用量为14%(14mL/100g干浸膏粉),干燥温度60℃,干燥10min,制粒的相对湿度为65%以下。在此条件下,颗粒平均密度为0.7464 g/mL,采用0号胶囊灌装,每粒装量约为0.5g。4.确定了制剂成品中桑叶的薄层鉴别方法和HPLC-MS/MS定量分析脱氧野尻霉素的条件,制定了制剂中脱氧野尻霉素、桑叶总多糖和总黄酮的含量限度范围,脱氧野尻霉素含量不低于143386mg/ g,桑叶总多糖含量不低于612.1930 mg/g,桑叶总黄酮含量不低于88.5849mg/g。结论通过采用Box-Behnken响应面法,考察了提取时间,提取温度,提取次数,料液比和提取溶剂pH值对桑叶生物碱提取率的影响,以桑叶生物碱,多糖和黄酮提取率为指标,确定各个提取因素的最佳值,使得试验模型具有更好的预测性。试验通过定量指标,以桑叶多糖,桑叶黄酮,桑叶生物碱活性成分保留率和固形物去除率设置综合评分,以综合评分为指标来判断不同澄清工艺的澄清效果,通过澄清剂加入量等单因素试验,确定影响显著的因素和水平,利用响应面优化来确定最佳澄清工艺,并且经过验证试验结果表明该工艺的结果稳定可行。采用正交试验优选桑元止渴胶囊的最佳制粒成型工艺,制粒粒度适中,胶囊装量均匀,美观。建立的质量标准稳定可行。可用于新药临床前试验,为中药新药申请提供试验数据基础。