番茄SSR，RAPD体系优化及Tm-2<'nv>基因的SCAR鉴定

• 作 者: 杨少军
• 机 构: 扬州大学
• 出 处: 山东农业大学
• 发表日期: 2006年期
• 关键词: 番茄 SSR RAPD 优化 SCAR标记 TM-2nv 鉴定

番茄（Lycopersicon esculentum Miller）是世界范围内广泛种植的蔬菜之一,在世界农业经济和农业市场中占有重要的地位。其独特的风味、丰富的营养、鲜艳的色彩和特殊的医用价值吸引着越来越多的消费者。年总产量已达8000万吨以上。但是,长期以来番茄的生产受到许多病害的影响,其中TMV、CMV、叶霉病、枯萎病、根结线虫病等是番茄生产中的主要病害。筛选和培育抗病品种是防治病害最为有效的方法。开展番茄抗TMV基因的分子标记和品种资源的抗病鉴定评价工作,有助于建立番茄分子标记辅助选择育种体系,获得更多的抗源材料,从而促进番茄抗病毒病遗传育种水平的显著提高。本研究的主要内容和结论如下:1、番茄SSR体系的建立和优化以部分番茄品种作为材料,对番茄SSR-PCR反应体系的中的Mg²⁺、dNTPs、Taq DNA聚合酶浓度以及退火温度和循环次数进行了探讨,确立了适合番茄SSR分析的技术体系:Buffer 10×,Mg²⁺ 3.0mmol·L^-1,dNTPs 0.5 mmol·L^-1,Taq DNA聚合酶浓度0.05 U·μL^-1,退火温度58℃,循环次数35次。2、番茄RAPD体系的建立和优化以部分番茄品种为材料,对番茄RAPD反应体系的Mg2+、dNTPs、Taq DNA聚合酶浓度,退火温度和循环次数进行了探讨,确立了适合番茄植物RAPD分析技术体系:Buffer 10×,Mg²⁺ 2.0mmol·L^-1,dNTP 0.5 mmol·L^-1,Taq DNA聚合酶浓度1U,退火温度41℃,循环次数45次。3、番茄抗烟草花叶病毒Tm-2^nv基因的克隆测序用抗Tm-2^nv的SCAR标记引物对含有抗TMV病毒的材料扩增分析表明,该SCAR标记是Tm-2^nv基因的特异标记。片段长度为700bp左右,利用该SCAR标记,可以更加方便地用于对Tm-2^nv基因的分子检测和辅助选择。