论文部分内容阅读
目的:观察氟伐他汀(Flu)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)血管紧张素Ⅱ1型、2型受体(AT1R、AT2R)表达的影响,探讨Flu在高血压肾损害肾小球硬化中的肾保护机制。
方法:1.选择处于对数生长期的3-8代HBZY-1细胞用于实验。2.将HBZY-1分成(1)正常对照组(C组):用含10%胎牛血清的MEM培养基培养;(2)AngⅡ诱导组(A组):在含血清培养基中分别加入不同浓度(0.1、1.0、10umol/L)AngⅡ共同培养,分别称为A1、A2、A3组;(3)Flu干预组(F组):在含血清培养基中先分别加入不同浓度(0.1、1.0、10umol/L)Flu预处理1h后再加入1.0umol/LAngⅡ诱导,分别称为F1、F2、F3组。3.细胞药物作用48h后检测指标:(1)采用WesternBlot法检测各组HBZY-1AT1R及AT2R蛋白表达水平;(2)MTT法检测HBZY-1细胞增殖水平;(3)ELISA法检测各组上清液中转化生长因子β1(TGF-β1)和Ⅳ型胶原(ColⅣ)的表达水平。
结果:1.AngⅡ诱导后:(1)A1、A2、A3组AT1R蛋白表达分别为(0.227±0.015,0.493±0.025,0.657±0.047),与C组(0.117±0.012)相比,均P＜0.01,HBZY-1的AT1R蛋白表达随AngⅡ诱导浓度的增加而增高(P＜0.01);(2)A1、A2、A3组AT2R蛋白表达分别是(0.325±0.016,0.217±0.017,0.123±0.001)与C组(0.406±0.026)相比,均P＜0.01,HBZY-1的AT2R蛋白表达随着AngⅡ诱导浓度的增加而降低(P＜0.01);(3)HBZY-1AT1R蛋白表达与细胞增殖、TGF-β1及ColⅥ的表达均呈正相关(R=0.986、0.937、0.973,均P≤0.001);(4)HBZY-1AT2蛋白表达与细胞增殖、TGF-β1及ColⅥ的表达均呈负相关(R=-0.990、.0.934、-0.973,均P≤0.001)。2.Flu干预后:(1)F1、F2、F3组AT1R蛋白表达分别是(0.970±0.010,0.550±0.036,0.247±0.015)与A组(1.207±0.021)相比,均P＜0.01,HBZY-1的AT1R蛋白表达随着Flu干预浓度的增加而降低(P＜0.01);(2)F1、F2、F3组AT2R蛋白表达分别是(0.353±0.015,0.718±0.016,0.820±0.016)与A组(0.173±0.008)相比,均P＜0.01,HBZY-1的AT2R蛋白表达随着Flu干预浓度的增加而增高(P＜0.01);(3)HBZY-1AT1R蛋白表达与细胞增殖、TGF-β1及ColⅥ的表达均呈正相关(R=0.990、0.819、0.909,均P≤0.001);(4)HBZY-1AT2R蛋白表达与细胞增殖、TGF-β1及ColⅣ的表达均呈负相关(R=-0.634、-0.768、-0.683,均P≤0.001)。
结论:Flu在高血压肾损害肾小球硬化中有肾保护作用,其机制可能是:通过下调HBZY-1AT1受体同时上调AT2受体的蛋白表达水平,从而影响AngⅡ的生物学作用,降低HBZY-1细胞增殖、TGF-β1及ColⅥ的表达水平。