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目的：建立人脐血间充质干细胞(UCB-MSCs)的体外分离培养体系,观察体外分离培养UCB-MSCs的生物学特性及补肾中药血清联合BMP-2对体外培养UCB-MSCs增殖、碱性磷酸酶(ALP)及骨钙素(BGP)表达的影响,探讨其对UCB-MSCs向成骨细胞分化的诱导作用。方法：取18只SD大鼠,补肾中药连续灌胃7天,颈总动脉取血制备补肾中药血清,采集人脐血标本,密度梯度离心法分离UCB-MSCs,倒置相差显微镜下观察原代培养的UCB-MSCs生物学特性,并经流式细胞仪进行细胞鉴定。取第3代UCB-MSCs随机分为4组,即A组(对照组)、B组(5%补肾中药血清组)、C组(50ng/mlBMP-2组)、D组(5%补肾中药血清+50ng/mlBMP-2组)。分别于诱导第1、3、5d MTT法观察各组对UCB-MSCs增殖的影响；第3、6、9、12d通过ALP染色及活性检测、骨钙素(BGP)含量检测观察补肾中药血清联合BMP-2对UCB-MSCs成骨活性表达的影响。结果：①原代培养的UCB-MSCs呈圆形,原代培养72h仅见少量贴壁细胞,近似圆形或椭圆形,7d首次换液可见分散的MSCs小集落,呈放射状生长。2周时细胞形态呈长梭形,3周时细胞集落彼此融合。传代细胞大部分24h内贴壁,一般3d即可达到80%-90%融合,细胞排列紧密,形态较均一,以梭形为主。②诱导培养第3、5d时,与对照组相比,补肾中药血清联合BMP-2组、BMP-2组均能够促进UCB-MSCs的增殖(P<0.05),尤以补肾中药血清联合BMP-2组为最佳(P<0.01)；第5天补肾中药血清联合BMP-2组与BMP-2组相比差异有统计学意义(P=0.041<0.05),而单独补肾中药血清组与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。③各诱导组第7dALP染色阳性表达较弱,第14dALP染色阳性增强,但各组强弱不等,其中对照组阳性表达较弱,补肾中药血清联合BMP-2组及BMP-2组较为显著,而联合组阳性表达最优,第21d染色阳性表达有所减弱。④与对照组比较,补肾中药血清联合BMP-2组、BMP-2组在诱导后3、6、9、12d均能提高ALP活性(P<0.05),其中补肾中药血清联合BMP-2组在诱导后3、6、9dALP活性与对照组相比有显著性差异(P<0.01)；补肾中药血清联合BMP-2组在诱导第6d时ALP活性与BMP-2组比较,差异有统计学意义(P=0.011<0.05)。⑤与对照组比较,BMP-2组、补肾中药血清联合BMP-2组在诱导后6、9、12d均能提高细胞上清液中骨钙素(BGP)含量,差异有统计学意义(P<0.05)。其中,补肾中药血清联合BMP-2组在诱导第9d时BGP含量与对照组比较差异有显著性意义(P=0.004<0.01)。结论：基于“肾主骨、生髓”理论的补肾中药血清联合BMP-2体外诱导人脐血间充质干细胞定向成骨分化的方法有效可行,二者能明显促进UCB-MSCs增殖与定向成骨分化,而单纯补肾中药血清此作用并不显著。