两株抗药性草莓枯萎病菌的生理生化特性研究

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为明确草莓枯萎病菌抗多菌灵突变体ZY-D及抗戊唑醇突变体ZY-W的生理生化特性,并分析其抗性风险和可能的抗性机制,本文以抗多菌灵达53.9倍的草莓枯萎病菌株ZY-D和抗戊唑醇达34.2倍的草莓枯萎病菌株ZY-W为材料,分别比较了两株抗性菌与敏感菌株ZY在苯丙氨酸解氨酶(PAL)和过氧化物酶(POD)的活力、渗透压敏感性、相对渗率和可溶性蛋白含量等方面的差异,研究结果如下:1.通过紫外分光光度计法测定三菌株体内的抗逆酶活力,我们发现在相同处理时间和药剂浓度条件下,两株抗性菌(ZY-D和ZY-W)体内的PAL和POD活力均高于敏感菌株ZY,且随着药剂处理浓度的升高而逐渐上升,各药剂浓度下的活力均高于空白对照。三菌株的POD活力随着处理时间的延长而逐渐增高,在24h达到最高值;两抗性菌株(ZY-D和ZY-W)的PAL活力呈先上升后下降的趋势,ZY-D菌株的PAL活力在6h达到最高值,ZY-W菌株在1.5h达到最高值,而敏感菌株体内的PAL活力始终处于上升状态。2.以菌落直径法测定三菌株的渗透压敏感性,结果表明:两抗性菌株(ZY-D和ZY-W)和敏感菌株ZY均对葡萄糖的高渗透压(8%)表现敏感,其中戊唑醇抗性菌株ZY-W对中高渗透压(6%、8%)均表现敏感。低剂量的氯化钠(20g/L)对敏感菌株的菌丝生长有促进作用,高浓度时对菌丝生长表现出抑制作用。两抗性菌株(ZY-D和ZY-W)的菌丝生长与氯化钠浓度成负相关性,其中对戊唑醇抗性菌株ZY-W对氯化钠更为敏感。3.以电导率法测定三菌株细胞膜透性,结果表明:以不同浓度的戊唑醇药液处理戊唑醇抗性菌株ZY-W和敏感菌株ZY不同时间后,ZY-W菌株的相对渗率始终低于ZY菌株,表明其渗透压调节能力高于敏感菌株。以不同浓度的多菌灵药液处理多菌灵抗性菌株ZY-D和敏感菌株ZY,ZY-D菌株的相对渗率均高于ZY菌株,表明其在较短的时间内渗出了更多的电解质。4.以考马斯亮蓝G250法测定三菌株的可溶性蛋白含量,其顺序为:ZY-W>ZY-D>ZY。菌株ZY-W和ZY-D体内的可溶性蛋白含量分别为ZY的1.34和1.19倍,且三个菌株间差异显著(P<0.05)。5.通过酯酶同工酶图谱分析发现,ZY-W菌株存在Rf=0.24的特征性谱带。
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