论文部分内容阅读
蜂毒因子Melittin是一种典型的抗菌肽，具有抗菌、抗病毒，抗肿瘤及增加基因递送效率等功能，但细胞毒性较高。前期研究发现，melittin的相关肽RV-23(来自加州红腿蛙Ranadraytonii)和AR-23（来自塔氏蛙Rana tagoi）分别具抗菌活性和增强基因转染的能力，而细胞毒性低于melittin。 目的:研究RV-23和AR-23与细胞膜的相互作用方式，初步探讨RV-23选择性抗菌作用的机理及生物相容性;研究AR-23羧基端带正电氨基酸对功能的影响，探讨其作为基因转染增强剂的可能性。 方法:合成了melittin，RV-23，AR-23， AR-20（AR-23的截短肽）和AR-26（C-末端序列与melittin相同）;圆二色谱分析多肽二级结构;溶血实验检测多肽穿膜能力;去极化实验观察多肽与细胞相互作用;荧光示踪实验观察多肽进入细胞及促进物质进入细胞的方式;转染和抑菌实验分析多肽增强基因转染和抗菌功能，多肽对血液中重要成分的影响评价其生物相容性。 结果:RV-23和AR-23均具有典型的α-螺旋结构;RV-23基于其特殊结构可选择性地与细菌结合、诱导细胞膜去极化，导致细菌裂解死亡;RV-23不与人细胞膜作用，溶血活性及细胞毒性均很低;RV-23不会对血小板，白蛋白及凝血系统功能产生影响，具有良好的生物相容性。AR-23对细菌及人红细胞无选择作用，但其裂解内含体释放的能力高于melittin，而溶血能力和细胞毒性低于后者;AR-23增强PEI介导的基因转染效率的能力也较melittin强。 结论: RV-23对细菌有选择性杀伤作用，是一种高效低毒的抗菌肽;净正电荷较少的AR-23，具有较强的内含体裂解能力和较低的细胞毒性，有望作为高效低毒的基因转染增强剂。