慢性再生障碍性贫血中医证型与外周血端粒长度变化、hTERT与hTP1基因表达水平的相关性研究

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目的:测定慢性再生障碍性贫血(Chronic aplastic anemia,CAA)患者外周血单个核细胞的端粒长度、端粒酶逆转录酶(hTERT)以及端粒相关蛋白1(hTP1)的表达水平,以探讨CAA中医辨证分型与外周血单个核细胞端粒长度变化、端粒酶逆转录酶(hTERT)以及端粒相关蛋白1(hTP1)的表达水平的相关性,进一步从分子水平探讨CAA的发病本质,以期寻求新的治疗思路。方法:首先将39例CAA患者按照中医辨证分型标准进行辨证分组,肾阳虚组13例、肾阴虚组13例、肾阴阳两虚组13例。运用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)检测39例CAA患者外周血单个核细胞的端粒长度、hTERT以及hTP1的表达水平。并选取30例正常人外周血单个核细胞作为对照组。观察CAA患者中医辨证分型与外周血单个核细胞端粒长度变化、hTERT以及hTP1的表达水平的关系;观察CAA患者年龄、性别与外周血单个核细胞端粒长度变化、hTERT以及hTP1的表达水平的关系。结果:(1)CAA患者外周血单个核细胞端粒长度变化情况同正常对照组比较无显著性差异(p>0.05),hTP1的表达水平同正常对照组比较明显升高(p<0.05);hTERT的表达水平同正常对照组比较明显降低(p<0.05);(2)肾阴虚型、肾阳虚型、肾阴阳两虚型CAA患者外周血单个核细胞端粒长度变化情况、hTP1及hTERT的表达水平,组间比较均无显著性差异(p>0.05);与正常对照组比较,肾阴阳两虚型CAA患者外周血单个核细胞hTP1的表达水平明显升高(p<0.05),肾阴阳两虚型CAA患者外周血单个核细胞hTERT的表达水明显降低(p<0.05);(3)按年龄分组, CAA患者>40岁组外周血单个核细胞端粒长度变化情况同CAA患者≤40岁组比较无显著性差异(p>0.05);CAA患者>40岁组外周血单个核细胞hTP1的表达水平同CAA患者≤40岁组比较明显升高(p<0.05); CAA患者>40岁组外周血单个核细胞hTERT的表达水平同CAA患者≤40岁组比较明显降低(p<0.05);(4)按性别分组,CAA患者外周血单个核细胞端粒长度变化情况、hTP1及hTERT的表达水平男性组与女性组比较,均无显著性差异(p>0.05);结论:肾阴阳两虚型CAA患者外周血单个核细胞hTP1的表达水平升高,hTERT的表达水平降低;CAA患者中大于40岁患者的外周血单个核细胞hTP1的表达水平升高,hTERT的表达水平降低;表明外周血单个核细胞hTERT mRNA的表达水平降低,端粒酶活性减低,可能是肾阴阳两虚型、>40岁的CAA患者的分子生物学的病机之一,而hTP1的表达水平升高可能为代偿性升高;由此推测hTERT表达水平的降低,hTP1表达水平的升高,端粒酶活性下降,可能是中医“肾虚”的分子生物学表现之一。
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