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目的:本课题组前期已证明淫羊藿苷作用于SHR大鼠改善勃起功能,目前尚未明确淫羊藿苷是否通过上调NRF2及其作用于信号通路改善氧化应激SHR勃起。NRF2可通过转录许多细胞保护性基因的转录以抗氧化,NRF2及其信号通路是抗氧化应激重要的细胞防御机制,本研究探索淫羊藿苷是否通过调节核因子类红细胞2-相关因2(Nuclear Factor Erythroid 2–Related Factor 2,NRF2)通路改善自发性高血压大鼠(Spontaneously Hypertensive Rats,SHR)的勃起功能。方法:随机将健康雄性WKY大鼠与健康雄性SHR大鼠分为4组(每组6只,共24只):WKY对照组(A组:WKY group)、WKY+淫羊藿苷组(B组:WKY treated by icariin group)、SHR对照组(C组:SHR group),SHR+淫羊藿苷组(D组:SHR treated by icariin group)。每只大鼠体重平均值约为300g,年龄约为10周龄。饲养动物房内使用淫羊藿高纯度提取物淫羊藿苷溶于生理盐水,使用长度9cm和针管直径1.6mm的不锈钢灌胃针按10mg/kg剂量灌胃B组和D组的大鼠,A组和C组予以等量生理盐水对照灌胃处理。规律灌胃及对照处理4周后,测定各大鼠血清睾酮水平、平均体重值、阴茎海绵体最大海绵体内压/平均动脉压(ICPmax/MAP)的比值和阴茎海绵体中NRF2、HO-1、e NOS、p-e NOS、PPAR-γ、DDAH、ADMA和c GMP等的含量。其中使用免疫组织化学测定NRF2、HO-1、PPAR-γ、DDAH1和DDAH2的表达,蛋白质印迹分析NRF2、HO-1、ppar-γ、DDAH1、DDAH2、e NOS和p-e NOS的表达,通过酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测ADMA、NO水平。结果:4周治疗后,测量各大鼠血清睾酮水平(WKY对照组:485.3±112.3ng/dl、WKY+淫羊藿苷组:299.5±6.5ng/dl、SHR对照组:301.2±5.9ng/dl、SHR+淫羊藿苷组:295.3±3.4ng/dl)四组均无显著差异。体重平均值(WKY对照组:300.2±3.3g、WKY+淫羊藿苷组:299.5±6.5g、SHR对照组:301.2±5.9g、SHR+淫羊藿苷组:295.3±3.4g)四组均无显著差异。电刺激大鼠阴茎海绵体测定ICPmax/MAP比值,WKY对照组(3V:0.27±0.03、5V:0.56±0.02)和WKY+淫羊藿苷组(3V:0.28±0.02、5V:0.56±0.03)相较无明显差异,SHR对照组(3V:0.08±0.04、5V:0.11±0.03)和SHR+淫羊藿苷组(3V:0.10±0.02、5V:0.21±0.04)相较显著降低(P<0.05)。蛋白质印迹分析方法检测SHR海绵体中NRF2、HO-1、e NOS、P-e NOS、PPAR-γ、DDAH1和DDAH2的表达,SHR+淫羊藿苷治疗组相比SHR组的NRF2、HO-1、e NOS、P-e NOS、PPAR-γ、DDAH1和DDAH2的表达显著增加(p<0.05),SHR+淫羊藿苷治疗组相比SHR组P-e NOS/e NOS表达的比值显著增加(p<0.05),WKY对照组和WKY+淫羊藿苷组间无明显差异。免疫组织化学测定SHR海绵体中NRF2、HO-1、PPAR-γ、DDAH1和DDAH2表达,SHR+淫羊藿苷治疗组相比SHR组的NRF2、HO-1、PPAR-γ、DDAH1和DDAH2的表达显著增加(p<0.05),而WKY组与WKY+淫羊藿苷治疗组的NRF2、HO-1、PPAR-γ、DDAH1和DDAH2的表达无明显变化。ELISA法检测SHR海绵体中c GMP、ADMA和NO的浓度。SHR+淫羊藿苷治疗组相比SHR组的NO和c GMP的表达显著增加(p<0.05),SHR+淫羊藿苷治疗组相比SHR组的ADMA的表达显著降低(p<0.05)。WKY组与WKY+淫羊藿苷治疗组相比c GMP、ADMA和NO的表达无明显变化。测定阴茎海绵体NRF2表达与P-e NOS/e NOS之间比例的相关性后,见海绵体中NRF2表达与P-e NOS/e NOS比例水平呈正相关(Y=0.052+0.309 X,r=0.915,p<0.01)。结论:淫羊藿苷通过上调大鼠阴茎海绵体NRF2表达,上调HO-1、DDAH和PPAR-γ和增加P-e NOS/e NOS比值而改善SHR的勃起功能。