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脑出血(Intracerebral hemorrhage,ICH)是常见的脑血管疾病之一,约占脑血管疾病的20％~30%。随着人们生活方式的变化及人口老龄化社会的到来,肥胖、高血压、糖尿病的发病率越来越高,这将进一步增加脑血管病的发病率。ICH的发病率和死亡率均高:其年发病率为(60~80)/10万人,急性期病死率为30%~40%,70%~80%存活的患者将会遗留神经功能或肢体功能缺损,给患者家庭及社会带来极大的负担。大量的证据表明,ICH发病最初几小时并不是病情最严重的时期,往往在2~3d后出现继发性神经损伤,引起脑损伤和神经功能缺损加剧。因此,近年来有关ICH继发性损伤的发病机制及其防治成为研究热点,研究发现天然免疫也参与了ICH之后的炎症反应。然而,ICH导致的炎症损伤的分子机制仍不明了。 TLRs(Toll-like receptors)是介导天然免疫的模式识别受体家族,属IL-1受体超家族成员,在免疫应答及炎症反应中起作用,目前在人类中共发现有11种亚型,分别命名为TLR1~11。TLR4是研究得较早且较多的TLRs受体之一,作为内毒素的跨膜识别受体,主要介导了革兰阴性菌感染和败血症休克的免疫反应。随着研究的进展,发现TLR4在老年性痴呆、脑缺血、帕金森等中枢神经系统疾病的炎性损伤病理过程中也发挥了重要作用。我们继往的研究发现,TLR4参与了ICH后的炎症损伤过程,Heme/TLR4途径是ICH炎症损伤的上游启动环节。提示我们TLR4可能成为ICH治疗的潜在靶点。本课题探讨了TLR4抑制剂TAK242对小鼠ICH模型的脑保护作用及机制。 我们通过尾状核立体定位注射小鼠自体未抗凝血20μl,建立了C57BL/6J小鼠ICH模型。ICH模型建立后6h腹腔注射TAK242(3mg/kg),连续5d。在ICH后第1、3、5d的时候检测小鼠神经功能缺损评分、脑水肿程度、血肿周围组织的炎症因子含量、细胞凋亡与神经元变性情况。同时利用流式细胞仪检测外周炎症细胞在血肿周围组织的浸润情况。结果显示,TAK242可以从以上方面减轻小鼠的脑损伤。 进一步利用WB方法检测ICH后TLR4下游的信号分子:MyD88、TRIF、Ikkβ、IκBα、NF-κBp65和phospho-NF-κBp65,结果显示TAK242抑制它们在ICH后的表达上调,提示TAK242可能通过阻断这一信号通路发挥作用。