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本研究采用基因芯片方法,比较喉鳞癌和正常喉粘膜,寻找差异表达基因,运用NCBI相关软件和信号通路的专业网站分析差异表达基因可能的信号通路,选择出2个有代表性的基因进行RT-PCR和免疫组化实验验证,观察该基因与喉鳞癌发病之间的关系,为进一步研究喉鳞癌发病分子机制、对该病开展早期基因诊断及基因治疗的可行性。
本研究中,我们应用基因芯片对喉鳞癌和正常粘膜中的差异表达基因进行分析,结果发现,Survivin基因属于差异表达上调基因之一。
运用信号通路网站筛选细胞凋亡和细胞周期调节基因的研究中,发现Survivin与HIV-INef:Fas和TNF(肿瘤坏死因子)的信号通路网络和p53信号通路相连,通过细胞有丝分裂中相关的纺锤体微管在G2/M期调控细胞周期,并且可以直接抑制Caspase-3和Caspase-7的活性,控制着细胞的增殖和寿命。我们先应用基因芯片技术对喉鳞癌和正常粘膜中的基因进行了比较,发现了451差异表达基因。
通过生物信息学分析筛选了一些在喉鳞癌发病中可能发挥重要作用的影响细胞周期调节和细胞凋亡的基因,然后挑选了GPR和Survivin基因,运用半定量RT-PCR、Real-timeRT-PCR、免疫组化等技术对其在喉鳞癌和正常粘膜中的表达进行了验证,结果与基因芯片结果一致。