苦皮藤内生真菌筛选及其代谢产物的农药活性研究

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植物内生真菌一般是指生活在植物组织体内的一类并不引起明显病害症状的真菌,它是一个庞大的特殊真菌类群,几乎所有的植物组织中都发现有内生真菌的存在[1]。由于真菌与植物之间长期的相互作用和共同进化,其代谢产物十分丰富,对其内生真菌的研究将有利于我国微生物资源的开发和珍稀植物资源的保护。本文以卫矛科植物苦皮藤为研究对象,研究其内生真菌的抑菌杀虫活性,并对菌株活性成分进行分离和鉴定。主要结果如下:1.采用组织块法,以马铃薯-葡萄糖培养基为内生真菌分离用培养基,从苦皮藤根和茎中分离得到56株内生真菌。筛选出5株产抗菌物质的菌株2K3, 2KR6, 2KR7, 1KM8和1KR8。这五株菌株的发酵产物对番茄灰霉病菌(Botrytis cirerea)、烟草赤星病菌(Alternaria alternate)、小麦赤霉病菌(Gibberella zeae)、玉米大斑病菌(Exserohilum turcicum)、苹果炭疽病菌(Glomerella cingulata)和马铃薯干腐病菌(Fusarium coeruleum)的菌丝生长有不同程度的抑菌作用。2.2K3菌株发酵产物的甲醇提取物有明显的抑菌作用,在1000μg·mL-1浓度下对番茄灰霉病菌、烟草赤星病菌、小麦赤霉病菌、玉米大斑病菌、苹果炭疽病菌和马铃薯干腐病菌等病原菌的菌丝生长抑制率均大于85%;盆栽试验结果表明,2000μg·mL-1的2K3菌株发酵产物的甲醇提取物对小麦白粉病菌(Erysiphe graminis)的治疗和保护作用均在70%以上。3.通过单因子试验对2K3菌株培养条件进行了优化。结果表明:培养温度26℃,接种量15块直径5mm菌饼(每瓶100 mL发酵液),初始pH值为7.0左右,转速180rpm,发酵时间240h,对2K3菌株抑菌活性最为有利。4.根据真菌的分类及鉴定方法,对比相关分类系统,将2K3菌株鉴定为镰孢菌属(Fusarium)真菌。
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