黄花败酱草二氯甲烷层化学成分及其促进肠蠕动活性研究

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目的:黄花败酱草属于败酱科(Valerianaceae)败酱属植物黄花败酱草(Patrina scabiosaefolia Fisch.ex Trev.)的全草,全草入药。为我国传统中药,具有清热解毒、消肿排脓、活血袪瘀的功效。本课题通过筛选黄花败酱草提取物具有促进肠收缩活性的萃取层,分离其中的单体化合物,探讨黄花败酱草具有促进肠管收缩的作用机制,为黄花败酱草单体化合物开发成制剂、制成临床药物提供一定的实验基础。方法:本文以黄花败酱草提取物为研究对象,根据前期实验结论,在最佳提取工艺条件下对黄花败酱草进行提取。利用离体肠实验方法,通过生物机能实验系统考察了黄花败酱草总提取物对SD大鼠的十二指肠、空肠、回肠和结肠四个不同肠段的收缩效果的影响。再测定各极性萃取物对最佳肠段收缩促进率,确定促进肠收缩最佳的活性部位,采用柱色谱、制备型高效液相色谱等方法分离最佳活性萃取部位,鉴定活性部位中分离得到的化学成分。结果:利用离体肠实验方法考察了黄花败酱草总提取物对SD大鼠的十二指肠、空肠、回肠和结肠四个不同肠段的收缩效果的影响,结果显示黄花败酱草总提取物对于促进结肠平滑肌的收缩作用效果最为显著。在此基础上结合各极性萃取物的得率,以结肠为实验肠段考察黄花败酱四个不同极性萃取物促进结肠平滑肌收缩的作用效果,结果显示黄花败酱草各萃取部位对SD大鼠结肠平滑肌均有收缩促进作用,不同萃取层活性强弱为:二氯甲烷层>乙酸乙酯层>水层>正丁醇层,二氯甲烷萃取层、乙酸乙酯萃取层、正丁醇萃取层和水层提取物对结肠平滑肌的最高促进率分别为:26.54±2.73%、15.59±3.05%、6.74±3.67%、10.78±3.24%,表明二氯甲烷层萃取物对结肠的收缩促进作用效果最为显著,继续考察了同等浓度下黄花败酱草四个不同极性层萃取物对结肠平滑肌收缩促进的作用效果,结果显示其中黄花败酱草二氯甲烷萃取层对结肠平滑肌促进作用最为显著。综合以上实验结果,选取黄花败酱草二氯甲烷层萃取物作为的活性部位,进一步研究其物质组成。从黄花败酱草最佳活性部位二氯甲烷萃取层中分离得到22个单体化合物,利用理化性质、现代波谱等方法鉴定出其中22个化合物的结构,分别为:齐墩果酸(oleanolic acid,1)、熊果酸(ursolic acid,2)、棕榈酸(palmitic acid,3)、月桂酸(dodecanoic acid,4)、α-生育醌(α-tocopherolquinone,5)、山楂酸(maslinic acid,6)、4-羟基-3-甲氧基苯甲醛(4-hydroxy-3-methoxybenzaldehyde,7)、2,6-二甲氧基苯醌(2,6-dimethoxy benzoquinone,8)、3β-乙酰氧基-12-烯-28-熊果酸(3β-acetyloxy-12-en-28-ursolic acid,9)、α-生育螺环B(α-tocospiro B,10)、22E-3β-羟基-5α,6α-环氧麦角甾-22-烯-7-酮(22E-3β-hydroxy-5α,6α-epoxyergosta-22-en-7-one,11)、2α-羟基熊果酸(2α-hydroxy ursolic acid,12)、亚油酸(linoleic acid,13)、β-谷甾醇棕榈酸酯(β-sitosterol palmitate,14)、3-羟基-1-(4′-羟基-3′-甲氧基苯)-1-丙酮[3-hydroxy-1-(4′-hydroxy-3′-methoxy-phenyl)-1-propanone,15]、橄榄树脂素(burselignan,16)、常春藤皂苷元(hederagenic acid,17)、6-甲氧基-7-(1′-二十一碳酰氧基-3′-羟基-2′-丙氧基)香豆素[6-methoxy-7-(1′-henicosacyloxy-3′-hydroxy-2′-propoxy)coumarin,18]、(+)-异落叶松树脂醇[(+)-isolariciresinol,19]、1α,3β-二羟基齐墩果-12-烯(castanopsol,20)、3β-羟基-11α-甲氧基齐墩果-12-烯(3β-hydroxy-11α-methoxy-olean-12-en,21)、十四酸-2,6,6-三甲基-1-(3′-氧代-1′-丁烯基)-7-氧杂二环[2.2.1]庚-2-基酯[tetradecanoic acid 2,6,6-trimethyl-1-(3′-oxo-but-1′-enyl)-7-oxabicyclo[2.2.1]hept-2-yl ester,22]。经过查询Scifinder和Reaxys数据库,其中化合物18,22未见有发表,是新化合物,而化合物5,7,8,10,11,15,16,19为首次从该属(Patrina)植物中分离得到。结论:本文研究了黄花败酱草提取物不同极性萃取层的促进肠蠕动的活性,发现黄花败酱草二氯甲烷层活性最高,并从中分离得到了22个单体化合物,其中2个新化合物,8个属内首分化合物,为进一步评价黄花败酱草治疗胃肠道疾病奠定了一定的物质基础。
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